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技术文章

ELISA加样时怎样避免气泡

点击次数:912   发布时间:2019/9/2 9:16:45

     通常气泡都是聚集在酶标板的孔周围,导致孔中液体不能与孔壁有效接触,使孔内反应不均一。很多说明书、教科书上也都提到,加样时要避免出现气泡,这到底是什么原因呢?因为在做实验的过程中,有时为了打干净枪头里面的液体,很容易产生气泡,是不是这样对实验结果会后什么影响?
 
    1.通常气泡都是聚集在酶标板的孔周围,导致孔中液体不能与孔壁有效接触,使
 
    2.孔内反应不均一。
 
    3.包被时有气泡的话,将导致包被不完全实际包被量下降--弱阳性甚至假阴性。
 
    4.封闭时有气泡的话,将导致大量未结合位点的存在,引起非特异性结合--本底增高,假阳性。
 
    5.加样时有气泡的话,抗原抗体不能有效的结合--弱阳性甚至假阴性。
 
    6.加二抗时有气泡的话,抗原抗体不能有效的结合--弱阳性甚至假阴性(竞争法相反----假阳性)。
 
    7.加显色液时有气泡的话---显色不完全。
 
    8.加终止液时有气泡的话(1、不能完全终止反应 2、影响酶标仪比色,OD值增高)
 
    9.洗涤时有气泡的话,非特异性结合物不能完全洗去,做无用功。
 
    避免方法:
    1.加样时尽量靠近孔底(不要接触孔底),用力均匀,不要过快过猛。
 
    2.封闭时一定要加满孔,
 
    3.洗涤时一定要加满孔(重要),气泡会浮上来*终驱除。手工洗板时一定要吸干水分并用力拍干。
 
    科研研究已进入全新时代,爱好生物研究的学者越来越多。不管您是花几百还是上千,甚至上万去购置试剂,这都是*简单的*步。您之后需要付出更多的是大量的时间和精力,再加上您的耐心和用心,才有可能把这条路走的更远。 
 

原创作者:上海elisa生物技术有限公司

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