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周期素依赖性激酶1抗体产地

周期素依赖性激酶1抗体产地

价格:电议

采购度:1194    原产地:美洲

发布时间:2014/3/25     更新时间:2024/11/21

为方面各位新老朋友们实验需求,我公司备有大量美国Abcam抗体原装现货,近期还有优惠活动,欢迎来到咨询。

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标签:抗体   

详细信息

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英文名称: Anti-Casein(bovine)
产品编号:B-02010
品  牌:Abcam

单克隆抗体的制备过程:
1、免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。
2、骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活)。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养,融合前24h换液一次,使骨髓瘤细胞处于对数生长期。
3、细胞融合的关键:   1技术上的误差常常导致融合的失败。例如,供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。
2融合试验的失败原因是污染,融合成功的关键是提供一个干净的环境,以及适宜的无菌操作技术。
4、阳性克隆的筛选 应尽早进行。通常在融合后10天作次检测,过早容易出现假阳性。检测方法应灵敏、准确、而且简便快速。具体应用的方法应根据抗原的性质,以及所需单克隆抗体的功能进行选择。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫荧光法等。其中ELISA法*简便,RIA法*准确。阳性克隆的筛选应进行多次,均阳性时才确定为阳性克隆进行扩增。
5、克隆化 克隆化的目的是为了获得单一细胞系的群体。克隆化应尽早进行并反复筛选。这是因为初期的杂交瘤细胞是不稳定的,有丢失染色体的倾向。反复克隆化后可获得稳定的杂交瘤细胞株。

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原创作者:上海elisa生物技术有限公司

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