此固相ELISA试剂盒利用的夹心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗体。之后加入的液态抗体可以结合到抗原分子的一个抗原决定簇上，而抗原分子可在温育期内结合到固相抗体上。样品中的抗原与酶标二抗一起在微孔内温育，此酶标二抗可结合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成正比。样品的结果可直接从标准曲线上读取。

二、操作要求

1.按说明书的要求准备实验中需用的试剂。

　　2.ELISA试剂盒中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。

　　3.自配的缓冲液应用pH计测量较正。

　　4.从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。

　　5.试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。

三、进口猪低分子肝素elisa试剂盒重点解析

1.正确稀释酶结合物

酶结合物的合适工作浓度需要通过预实验来确定，浓度过高易导致本底偏高，浓度过低则会导致阳性信号的减弱。在使用前稀释，稀释后的酶结合物不宜长期保存，因为低浓度的酶结合物极易失活。

2.配制

对于每种细胞因子应仔细阅读说明书，注意每批的细节。在使用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。为了优化灵敏度，建议孵育标准品和标本。若使用过氧化物酶作为显色系统，应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。

3.质量控制是监视全过程，排除误差，防止变化，维持标准化现状的一个管理过程。这一过程是通过一个反馈环路进行的，主要采用质控图进行。　

原创作者：上海elisa生物技术有限公司

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