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联系人:张经理
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传 真:021-64881400
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价格: 2200
采购度:1221 原产地:美洲
发布时间:2012/10/29 更新时间:2024/11/21
上海elisa技术生物科技有限公司本月推出美国RD“溶菌酶试剂盒(人)”,盒盒打折,买的越多,折扣越多,惊喜连连!
科研样品ELISA 检测服务
凡购买本公司目录任何一种检测试剂盒,您只需将需要检测的动物种类和检测指标(介素类、因子类)及标本数量(48T/96T )通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起,现货产品一周内将检测报告交到客户手中!欢迎临床医学界和各科研单位在各种项目上与我们开展不同层次的密切合作,以双赢求发展,共同进步,为中国检测事业的发展积累经验。
标本的稀释原则:
首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。*后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则:2瓶,使用前于6000-10000rpm离心30秒。每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为10 ng/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释10 ng/ml, 5 ng/ml, 2.5 ng/ml, 1.25ng/ml, 0.62 ng/ml, 0.32ng/ml, 0.16 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制,用完丢弃,下次检测使用新鲜配置的标准品。
如配制5 ng/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)10 ng/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
生物素标记抗体的稀释原则:
打开瓶盖前请离心,收集瓶壁上的溶液。临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:
打开瓶盖前请离心,收集瓶壁上的溶液。临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
上海elisa生物科技有限公司是中国权威的科研实验生物试剂销售服务商。产品货期快、质量品牌保障,欢迎各位新老客户惠顾!ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。
Elisa试剂盒咨询和订购的方法:
1.可来电向我们直接咨询及订购。
2.可点击本页上方“QQ交谈”向我司在线人员咨询及订购。
3.可在本页下方留言栏内留言,我们会在半个工作日内联系您
上海恒远生物科技有限公司专业提供科研类ELISA试剂盒,抗体,是多家科研机构和高校指定溶菌酶ELISA试剂盒供应商,品种齐全,价格优惠。欢迎您来电来函。
产品名称:
操作步骤:
参照说明书
灵敏度:
具体请查看说明书.
检测范围(RANGN):
具体请查看说明书.
参考值:
产品用途:
科研ELISA检测试剂盒.提供实验代测服务.您只需将需要检测的种属(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey, Pig……)和检测指标(介素类、因子类)及标本数量(48T/96T)通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起,现货产品一周内将检测报告交到客户手中!
产品范围:
人,小鼠,大鼠,猪,兔,其它动物细胞因子;细胞凋亡,活性多肽、自身抗体 ,血栓与止血,骨代谢,肝纤维化,肿瘤,激素内分泌、自身抗体科研ELISA检测试剂盒
“”操作步骤:
用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
↓
加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
↓
于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml, 37℃孵育30-60分钟,洗涤,*后一遍用DDW洗涤。
↓
加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
↓
终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
↓
结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
上海恒远生物技术有限公司经过数年的努力已迅速成为集科研和生产为一体的专业化生物工程公司。特别是ELISA研发这一产品已使上海恒远成为中国知名公司。
公司产品涵盖生物培养基、人ELISA试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、大鼠ELISA试剂盒、ELISA研发、细胞培养,各种生化试剂、各种酶类、分子生物学试剂盒、培养基等。此外、上海恒远还代理了Amresco,R&D,RB,sigma,IBL,Santa cruz,wako,omega,ATCC,ScienCell,Bioworld,Spectrum等国外各类知名公司的产品。
上海恒远生物将进一步加强人才经营、产品经营,不断提升企业的核心竟争力,实现具有高科技产业体系、知识化创业团队的化的公司,服务于生命科学领域,迎接世界经济一体化所带来的机遇与挑战。
产品名称:
检测范围:来电咨询
样品形式:血清/血浆/细胞培养上清/其它生物液体(具体情况请咨询)
保存与运输:短期4℃/长期-20℃保存
应用范围:科研用检测试剂
ELISA 试验时,注意事项如下:
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好http://www.hyelisa.com/
。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的*适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值而蛋白量*少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入
上海恒远生物科技有限公司专业供应各种属elisa试剂盒,提供免费代测服务,保证实验结果客观真实
性。我公司对试剂盒质量100%保证,若存在质量问题,我们无条件包退换。若需要了解试剂盒的详细信息,请来的咨询
“”样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
“”计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
产品名称:
产品规格:96人份/48人份
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
标本收集:
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA,标本采集后30分钟内于 1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂标本。
3. 其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测
4. 标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。
5.标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃电冰箱内,避免反复冻融,1-6月内检测,4℃保存的应在1周内进行检测。
6. 如果您的样本中检测物浓度高于标准品值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。
好消息,上海恒远生物科技有限公司又新推出大鼠ELISA试剂盒系列产品,公司新品正在陆续上传中,欢迎老师和同学们随时关注。我司产品涵盖人ELISA试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、大鼠ELISA试剂盒、胎牛血清、培养基、标准品、抗体、化学试剂等等,公司产品几乎涉及所有领域,代表了品质。
人常见ELISA试剂盒系列:
人:IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2R、IL-27、IL-23、IL-17、IL-18、IL-9、IL-8、IL-6、IL-5、IL-4、IL-2、IL-13、IL-11、IL-10、IL-12P70、IL-12P40、IFN-ω、IFN-β、IFN-α、 IFN-γ、TNF-β、TNF-α、sICAM-1、LEP、MMP-3等
大鼠常见ELISA试剂盒系列:
大鼠:TNF-α、IL-1β、IL-7、IL-32、IL-21、IL-27、IL-23、IFN-γ、TGF-α、TGF-β1等
小鼠常见ELISA试剂盒系列:
小鼠:IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-13、IL-10、IL-11、IL-17、TNF-α、TNF-β、VEGF、TGF-β1等
另有兔、猪、猴、鸡、鸭、羊、植物等多种种属ELISA试剂盒,所有试剂盒经过充分验证,保证有效且重复性佳。
新品上传中,欢迎老师和同学们随时关注我司本站动态,欢迎来电咨询。
“” 四大优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型。
(插入名称)使用说明书
请仔细阅读说明书并按说明使用或在我司业务员指导下购买和使用
产品名称:
英文名称:
产品性状:液体
产品用途:科研实验专用
产品规格:96T/48T
96T指可以做94个标本,2个标准对照
48T指可以做47个标本,1个标准对照
96T-84个样本
48T-42个样本
(插入名称)操作注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
贮藏:2-8℃
包装:盒装,96T/盒、48T/盒
有效期:6个月
如有问题可与我司业务员联系!
(插入名称)说明书
请仔细阅读说明书并按说明使用或在我司业务员指导下购买和使用
产品名称:
产品性状:液体
产品用途:科研实验专用
产品规格:96T/48T
96T指可以做94个标本,2个标准对照
48T指可以做47个标本,1个标准对照
96T-84个样本
48T-42个样本
服务承诺:
1.凡在本司购买elisa试剂盒的客户,可享受我司提供免费代测服务及中英文双版说明书
2.购买斯百全旗下产品,我司可提供质量检测报告
3.我司对售出产品提供完整售后服务,如有问题可与我司业务员联系!我们会以*快的速度为你解决一切问题
(插入名称)内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶标板 1块板(96T) 半块板(48T) 即用型
塑料膜板盖 1块 半块 即用型
标准品:1600ng/L 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按说明书进行稀稀
空白对照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
标准品稀释缓冲液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
生物素标记的抗Dopamine抗体 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
洗涤缓冲液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按说明书进行稀释
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
终止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
标本稀释液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型
贮藏:2-8℃
包装:盒装,96T/盒、48T/盒
有效期:6个月
公司名称:上海恒远生物科技有限公司
如有问题可与我司业务员联系!
上海恒远生物科技有限公司主要销售进口elisa试剂盒、人elisa试剂盒、生物试剂、人(AB)血清、抗体、培养基、对照品、农药标准品等科研试剂,产品优质耐用,性价比好,值得信赖。
产品名称:
产品规格:96人份/48人份
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
产品范围: 人,小大鼠,猪,兔,其它动物细胞因子;细胞凋亡,活性多肽,自身抗体 ,血栓与止血, 骨代谢,肝纤维化,肿瘤,激素内分泌,自身抗体科研ELISA检测试剂盒
待检样本:体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等等。
保存条件:2-8℃
性状:盒装液体
销售优势:量大从优、质量保证、如果质量问题包退换、含税含运费。
操作步骤:
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
上海恒远公司是国内免疫学产品主要供应商,提供各种原装、分装“”,质优价廉,且售后服务完整,有任何试剂盒方面的问题都能帮您解决。免除您的后顾之忧。并提供免费代检测,更好的为您服务。如有其他问题请及时联系我们。
名称
产品包装:48T/96T
性状:盒装液体
作用:科研使用
本试剂盒现货供应,免费代测,产品上架一个星期内,参与促销活动。可以协助实验和委托实验,技术人员全程指导。我们会在您交付标本的一个星期内出结果,将实验过程和结果快递到您手中!我公司试剂盒产品在质量和价格都有绝对优势,产品售前、售中、售后都有专人服务,请您放心购买!产品上架过程中,为提升业绩,elisa试剂盒产品促销活动中。。。。。
Elisa试剂盒实验规则:
1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
4、实验时,要使底物避光保存。
5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
9、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。
10、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
试剂盒组成及试剂配制:
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
elisa试剂盒说明书/价格/报价/代理商/经销商/生产商/供应商:免费代测(名称)价格
上海恒远供应其他优质试剂产品:人常见ELISA试剂盒系列:
人:IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2R、IL-27、IL-23、IL-17、IL-18、IL-9、IL-8、IL-6、IL-5、IL-4、IL-2、IL-13、IL-11、IL-10、IL-12P70、IL-12P40、IFN-ω、IFN-β、IFN-α、 IFN-γ、TNF-β、TNF-α、sICAM-1、LEP、MMP-3等
大鼠常见ELISA试剂盒系列:
大鼠:TNF-α、IL-1β、IL-7、IL-32、IL-21、IL-27、IL-23、IFN-γ、TGF-α、TGF-β1等
小鼠常见ELISA试剂盒系列:
小鼠:IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-13、IL-10、IL-11、IL-17、TNF-α、TNF-β、VEGF、TGF-β1等
(插入名称)
上海恒远生物科技有限公司代理了各大小医院,高校实验室,科研单位,疾控中心等机构常用的科研检测酶免ELISA试剂盒,种属有:人(human),大鼠(rat),小鼠(mouse),豚鼠(guineapig),犬(dog),兔(rabbit),猪(porcine),牛(bovine),羊(goat),猴(monkey)Elisa试剂盒
细胞因子系列检测试剂盒 肿瘤标志物系列检测试剂盒
自身免疫系列检测试剂盒 心脏病系列检测试剂盒
内分泌系列检测试剂盒 心肌梗塞系列检测试剂
盒肝纤维化系列检测试剂盒 传染病系列检测试剂盒
微生物传染病系列检测试剂盒 细胞免疫系列检测试剂盒
优生优育系列检测 特种蛋白系列检测
它的方法类型和操作步骤如下:ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
(插入名称)性能
1. 灵敏度:*小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
(插入名称)咨询和订购的方法:
1.可来电咨询及订购。
2.可点击本页上方“QQ交谈”向我司在线人员咨询及订购。
3.可在本页下方留言栏内留言,我们会在半个工作日内联系您
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上海恒远生物科技有限公司多年专业酶免服务,质量保证,可免费提供代测服务,一周内出结果。欢迎来电咨询订购:“名称 ”
试剂盒组成:48孔/96孔
保存:2-8℃
主要用途:科研检测
样本要求
1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。
2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。
“名称”提供免费代测服务:使用我公司试剂盒,只收取试剂盒的费用,其他辅助试剂全部免费。
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二甲亚砜CAS:2206-27-1,DMSO-d6,D.99.9%
十二烷基二 甲 基乙基溴化铵CAS:68207-00-1,EDDAB)Dodecylethyldimethylammoniumbro,干燥、室温,应用于催化剂,乳化剂,消毒剂,杀菌基,抗静电剂等,超纯级
硫酸钯CAS:13566-03-5,Palladiumsulfat,室温阴凉处密封储存,Pd51.2%-53.9%
39807-15-3,丙 炔恶草酮,标准品,Oxadiargyl,高效广谱稻田除草剂,对一年生禾本科、莎草科、阔叶杂草和某些多年生杂草效果显著,对恶性杂草四叶萍有良好的防效。
邻苯二甲酸二苯酯CAS:84-62-8,DiphenylPhthalat,分析标准品
CAS:61790-53-2,硅藻土G/硅藻土(含硫酸钙)/硅石/才利特/丙岩/C石(钙铁石)/Kieselguhr G,AR,98%,500克,RT
100026,磺胺嘧啶 ,标准品,含量测定,常温,避光,
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CAS:69563-88-8,2,2-双[4-(4-氨基苯氧基苯)]六 氟丙烷,97%价格|现货,Hexafluoroisopropylidene)bis(p-phenyleneoxy)diani,0.97
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乙二胺四乙酸二钠钙CAS:23411-34-9,EthylenediaminetetraaceticacidcalciumDisodiumsalthy,AR
111808,相思子碱,标准品,供鉴别用,常温,避光
产品名称:
英文名称:
产品性状:液体
检测范围:62.5 pg/ml - 4000 pg/ml
检测限:15.6 pg/ml
试剂盒组成:48孔/96孔
主要用途:科研检测
有效期:6个月
保存:2-8℃
(插入名称)说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
(插入名称)标本采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
标本的稀释原则:
首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。*后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为4000 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释4000 pg/ml,2000 pg/ml,1000 pg/ml,500 pg/ml,250 pg/ml,125 pg/ml,62.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制2000 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)4000 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
生物素标记抗体的稀释原则:
临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:
临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
(插入名称)价格、促销、说明书等相关内容,欢迎您来电向我司业务人员索取相关资料,具体操作步骤按说明书使用或在我司业务员指导下购买和使用。
(插入名称)操作步骤及注意事项
试剂盒组成:48孔/96孔
主要用途:科研检测
产品规格:96T/48T
96T指可以做94个标本,2个标准对照
48T指可以做47个标本,1个标准对照
96T-84个样本
48T-42个样本
有效期:6个月
保存:2-8℃
(插入名称)操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
注:
1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是*后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液、或辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
需要而未提供的试剂和器材
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器
6. 蒸馏水,容量瓶等
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
(插入名称)注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请*后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
7. 底物请避光保存。
8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
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产品名称:
产品规格:96人份/48人份
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
产品用途:科研ELISA检测试剂盒.本公司可提供实验代测服务.
检测原理: 采用双抗体夹心ABC-ELISA法
产品种属齐全有:人,小鼠,大鼠,豚鼠,猪,犬,兔,牛,羊,猴,兔,马等动物种属。
待检样本:体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等等。
保存条件:2-8℃
服务承诺:工作时间内免费的技术咨询和指导,为客户提供来样检测服务,限度实验结果的有效性。
服务内容:
凡购买本司目录任何一种检测试剂盒(酶联免疫、放射免疫),您只需将需要检测的动物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……)种类和检测指标(介素类、因子类)及标本数量(48T/96T)通知我司业务人员即可。在接到客户标本当日起,一周内将检测报告交到客户手中!
公司主营产品:ELISA试剂盒、放免试剂盒、金标试剂盒、抗体抗原、血清、生化试剂、各种酶类、分子生物学试剂盒、培养基等。此外,公司与国内很多的企业都建立了长期的友好合作关系。等世界知名产品。本着“质量,诚信为本”的理念,以优良的服务质量和实惠的价格,赢得广大的市场。
上海恒远生物科技有限公司代理几千种 ELISA 试剂盒,数万种抗体,并代理世界级产品近万种,涉及分子生物学、分子免疫学、细胞生物学等生命科学研究的各个领域。为了节省您的时间,我们还可以提供代检测服务。
服务承诺:
1. 所购产品均质量保证,有任何质量方面的问题,一律免费包换!
2. 试剂盒方面全程提供技术指导,还有免费代测的服务!
3. 本公司出售的任何产品均是保质保量,客户有任何疑问,均是一个工作日,给出解决方案!
(插入名称)注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请*后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
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“名称”Elisa试剂盒,Elisa试剂盒价格,Elisa试剂盒说明书,Elisa试剂盒技术咨询,Elisa试剂盒免费代测。
规格:96人份/48人份
包装:进口、分装、原装
主要作用:科研
试剂盒种属:人、大小鼠、豚鼠、猪、鸡、兔、羊、猴、兔、马...
待检样本:体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等等。
上海恒远生物科技有限公司主营产品:人ELISA试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,细胞因子,试剂,人ELISA检测试剂盒,大鼠ELISA检测试剂盒,人白介素ELISA试剂盒,大鼠肿瘤坏死因子ELISA试剂盒,人IL-6ELISA试剂盒,干扰素ELISA试剂盒,生物试剂,生化试剂,化学试剂,血清,标准品,抗体,培养基等。
本公司可为您提供科研ELISA试剂盒;人、大小鼠、猪、狗、羊、兔子、豚鼠ELISA;各种标本血清/血浆/细胞上清液/组织...;农残检测ELISA试剂盒;动物疾病检测ELISA试剂盒;化学发光试剂盒;甲状腺放免试剂盒;性腺类放免试剂盒;肿瘤检测放免试剂盒;抗体纯化试剂盒;原位杂交试剂盒;OMEGA试剂盒;RNA,DNA,PCR,质粒;抗原抗体一抗二抗;酶标记抗体;胶体金标记抗体;生物素标记抗体;亲纯化二抗IgG;荧光素标记抗体;免疫血清;免疫球蛋白抗原;辅助试剂;标准品对照品;植物提取物;银杏叶提取物;对照品药材;中药对照品;常用试剂;分子生物学;DNA;聚合酶;RT-PCR;PCR Mix;核酸纯化;DNA Marker;荧光定量PCR;蛋白质产品;限制性内切酶;常用生化试剂;酶和辅酶;碳水化合物;生物缓冲液;培养基;蛋白质;抗生素;维 生素;氨基酸;核酸及衍生物;动物血清;其它生化试剂等产品
样品类型(SAMPLE TYPES):
标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清 或血浆。每个标本量收集体积=100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
主要分为以下系列:1.细胞因子检测试剂盒 2.内分泌检测试剂盒 3.肝纤维化检测试剂盒 4.心肌梗塞检测试剂盒 5.肿瘤标志物检测试剂盒 6.自身免疫检测试剂盒 7.优生优育检测试剂盒 8.传染病检测
试剂盒价格, elisa试剂盒批发, elisa试剂盒供应商
产品名称:
种 属:
产品用途: 科研ELISA检测试剂盒.提供实验代测服务
产品范围: 人,小鼠,大鼠,猪,兔,其它动物细胞因子;细胞凋亡,活性多肽、自身抗体 ,血栓与止血, 骨代谢,肝纤维化,肿瘤,激素内分泌、自身抗体科研ELISA检测试剂盒
保存条件:2-8℃
常见elisa试剂盒:
特种蛋白检测elisa试剂盒
如免疫球蛋白,抗链O-aso,类风湿因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等等
标本的采集及保存 ;
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
上海恒远生物科技有限公司是一家生物技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。并代理销售Amresco、Omega、Sigma、R&D、ATCC、HYCLONE等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务,满足生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物实验需求。
我们的服务理念:一切以诚信为本,一切以用户价值为依归
一切以诚信为本
为顾客提供售前、售中、售后的全方位服务,不求,只为更好。
一切以用户价值为依归
坚持“用户”理念,为用户创造价值、维护用户正当利益是经营的要务;保持对用户需求的敏感,重视用户的消费体验,服务水平适当超出用户的期望注重培育用户的满意度和忠诚度,不断提高与用户沟通的服务水平;以用户价值的化创造公司价值的化。
“名称” 含税含运费,免费提供实验代测服务以及中英文双版说明书,试剂盒价格等相关内容可来电咨询我司业务人员。
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服务承诺:
1. 所购产品均质量保证,有任何质量方面的问题,一律免费包换!
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3. 本公司出售的任何产品均是保质保量,客户有任何疑问,均是一个工作日,给出解决方案!
加样可能原因: 1)血清或血浆标本分离不好即进行加样; 2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法: 1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。 2) 加样后及时放入孵箱。 3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5) 标本较多时,请分批操作。
标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积=100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
(插入名称)样品采集:
收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,
将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。
SPECIMEN COLLECTION\\ PROCESSING AND STORAGE
? Serum---Avoid any inintentional stimulation of the cells by the procedure. Use pyrogen\\endotoxin free collecting tubes. Serum should be removed rapidly and carefully from the red cells after clothing. For that, after clothing, centrifuge at approximately 1000×g for 10 min and remove serum.
? Plasma---EDTA\\ citrate and heparin plasma can be assayed. Spin samples at 1000×g for 30 min remove particulates. Harvest plasma.
? Cell culture supernatants---Remove particulates and aggregates by spinning at approximately 1000×g for 10 min.
? Storage---If not analyzed shortly after collection, samples should be aliquoted(250-500ul) to avoid freeze-thaw cycles and stored frozen at -70℃. Avoid multiple freeze-thaw cycles of frozen specimens. When possible, avoid use of badly hemolyzed or lipemic sera. If large amounts of particles are present, this should be removed prior to assay by centrifugation or filtration.
? Recommendation---Do not thaw by heating at 37℃ or 56℃. Thaw at room temperature and make sure that sample is completely thawed and homogenous before assaying.
PREPARATION OF REAGENTS
? Standards: Standard have to be reconstituled with the volume of standard buffer diluent indicated on the vial. This reconstitution produces a stock solution of 1600ng/L Dopamine. Allow standard to stand for 5
? minutes with gentle swirling prior to making dilutions. Serial dilutions of standard must be made before each assys and cannot be stored.
上海恒远生物科技有限公司代理几千种 ELISA 试剂盒,数万种抗体,并代理世界级产品近万种,涉及分子生物学、分子免疫学、细胞生物学等生命科学研究的各个领域。为了节省您的时间,我们还可以提供代检测服务。
上海(插入名称)
上海恒远生物科技有限公司免疫学产品
Elisa试剂盒
细胞因子Elisa试剂盒
人细胞因子(原装) 小鼠细胞因子(原装) 大鼠细胞因子(原装)
人细胞因子(分装) 小鼠细胞因子(分装) 大鼠细胞因子(分装)
其他动物细胞因子
凋亡、活性多肽试剂盒 血栓与止血试剂盒 肝纤试剂盒
肿瘤试剂盒 激素、内分泌、自身抗体试剂盒
抗体
抗体 免疫组化试剂 蛋白印迹和电泳试剂
重组蛋白
人细胞因子 大鼠细胞因子 小鼠细胞因子
洗板方法
1. 手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2. 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性
本试剂盒可同时检测重组或天然的人C3,且与其它相关蛋白无交叉反应。
(插入名称)说明
1. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2. 小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,个孔与*后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且,洗涤不充分将影响试验结果。
3. 试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。
4. 浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
5. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
6. 中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
7. 所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8. 有效期:6个月
自备物品
1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)
2. 微量加液器及吸头,EP管
3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸
(插入名称)实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗C3抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的C3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
产品名称:
产品性状:液体
产品用途:科研实验专用
产品规格:96T/48T
96T指可以做94个标本,2个标准对照
48T指可以做47个标本,1个标准对照
96T-84个样本
48T-42个样本
上海恒远生物科技有限公司是一家生物技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。同时我们提供专业的生物技术服务。
公司一方面注意跟踪世界范围分子生物学、细胞生物学等生物学科的发展前沿,努力将美国专业生产厂家的具有水平的产品推荐给各类研究人员;另一方面也非常重视自主产品研究和开发,推出了一系列具有竞争力的产品和服务。公司的经营原则是“质量,诚信,品牌”,以“质量是企业的生命,诚信是经营的资本”为警醒 ,严把所售出商品的质量关。公司客户遍布大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、生物技术公司等单位。 主营代理产品:ELISA试剂盒,Omega试剂盒,放免试剂盒,血清,抗体,生物科研试剂等。
公司代理品牌:Amresco,R&D,sigma,Santa cruz,wako,omega,ATCC,ScienCell,Bioworld,Spectrum....
(插入名称)所需要样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右 (2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清 。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
“名称”全国一级代理商优惠大酬宾,含税含运费,本司免费提供实验代测服务。
(插入名称)说明
1. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2. 小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,个孔与*后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且,洗涤不充分将影响试验结果。
3. 试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。
4. 浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
5. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
6. 中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
7. 所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8. 有效期:6个月
产品规格:96人份/48人份
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
产品范围: 人,小大鼠,猪,兔,其它动物细胞因子;细胞凋亡,活性多肽,自身抗体 ,血栓与止血, 骨代谢,肝纤维化,肿瘤,激素内分泌,自身抗体科研ELISA检测试剂盒
待检样本:体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等等。
保存条件:2-8℃
Elisa试剂盒安全性:
1. 避免直接接触终止液和底物。如不小心接触到这些液体,请尽快用水冲洗;
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品;
3. 不要用嘴接触试剂盒里的任何成份;
4 Elisa试剂盒请远离儿童。
(插入名称)自备物品:
1 、 37 ℃ 恒温箱;
2 、 标准规格酶标仪;
3 、 精密移液器及一次性吸头;
4 、 蒸馏水;
5 、 一次性试管;
6 、 吸水纸。
上海恒远生物科技有限公司主要供应进口ELISA试剂盒、血清、抗体、金标试剂盒、生物试剂、培养基、一抗、二抗等产品,是一家专门从事生物技术相关产品研发和销售的综合性生物科学公司,产品畅销国内大部分地区。公司专注于高品质ELISA试剂盒的整合和研发,打造国内,*优的ELISA试剂盒,希望公司的ELISA试剂盒能为国家科研做出卓越的贡献。
贮藏:2-8℃
包装:盒装,96T/盒、48T/盒
(插入名称)有效期:6个月
上海恒远生物科技有限公司将以*卓越的品质和*周到的服务竭诚为您服务!
(插入名称)样品收集、处理
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
上海恒远生物科技有限公司经过数年的努力已迅速成为集科研和生产为一体的专业化生物工程公司。特别是ELISA研发这一产品已使上海成为中国知名公司。
公司产品涵盖生物培养基、人ELISA试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、大鼠ELISA试剂盒、ELISA研发、细胞培养,各种生化试剂、各种酶类、分子生物学试剂盒、培养基等。此外、上海还代理了Amresco,R&D,sigma,Santa cruz,wako,omega,ATCC,ScienCell,Bioworld,Spectrum等国外各类知名公司的产品。
上海恒远生物科技有限公司将进一步加强人才经营、产品经营,不断提升企业的核心竟争力,实现具有高科技产业体系、知识化创业团队的化的公司,服务于生命科学领域,迎接世界经济一体化所带来的机遇与挑战。
(插入名称)操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
试剂盒性能
1. 灵敏度:*小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
(插入名称)检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA),本司对所售出产品提供全面售后服务,保证质量,欢迎来电咨询。
上海恒远生物(插入名称)10个优点:
1、高效、灵敏、特异的抗体;
2、稳定的重复性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
5、种属齐全:人(Human) 、大鼠(Rat) 、小鼠(Mouse) 、猴(Monkey) 、兔(Rabbit)、
猪(Pig) 、马(Horse) 、鱼、鸡、鸭、羊等等;
6、可检测指标齐全:细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免
疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、优生优育检测等等;
7、限度的节省实验经费;
选择余地
8、进口分装:可靠的实验结果,且还具有优廉的价格,更经济实惠;
9、原装进口:优质的质量,高的灵敏度、精密度、重现性、特异性,帮您在实验室更加节
省时间;
全面的技术服务
10、从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供完整的技术指导。
提供免费代测服务(为您节省时间),欢迎向我司业务人员索取各 ELISA 试剂盒的产品说明
书。
间接法是检测抗体*常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下:
(1)将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原:洗涤除去未结合的抗原及杂质。
(2)加稀释的受检血清:其中的特异抗体与抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合,在洗涤过程中被洗去。
(3)加酶标抗抗体:与固相复合物中的抗体结合,从而使该抗体问接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体,可用酶标羊抗人IgG抗体。
(4)加底物显色:颜色深度代表标本中受检抗体的量。
本法只要更换不同的固相抗原,可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。
(插入名称)间接法、竞争法、捕获法,捕获法测IgM抗体
血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在,后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗体多用捕获法,先将所有血清IgM(包括特异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再测定特异性IgM。操作步骤如下:
(1)将抗人IgM抗体连接在固相载体上,形成固相抗人IgM。洗涤。
(2)加入稀释的血清标本:保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。
(3)加入特异性抗原试剂:它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。
(4)加入针对特异性的酶标抗体:使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。
(5)加底物显色:如有颜色显示,则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在,是为阳性反应。
(插入名称)原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法,保存条件:2-8℃,本司提供代测服务,试剂盒价格、说明书欢迎来电咨询。
产品名称:
产品规格:96人份/48人份
产品用途:科研ELISA检测试剂盒.本公司可提供实验代测服务.
检测范围:详见说明书
服务承诺:工作时间内免费的技术咨询和指导,为客户提供来样检测服务,限度实验结果的有效性.
(插入名称)组成
1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(16ng/L) 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
ELISA实验中标本的采取和保存
可用作ELISA测定的标本十分广泛,比如体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。
制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
运输条件低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
试剂盒厂家,进口elisa试剂盒,试剂盒供应商,elisa试剂盒报价
(名称)6个特点:
1、高效、灵敏、特异的抗体;
2、稳定的重复性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
5、可检测指标齐全:细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、优生优育检测等等;
6、价格优惠,质量保证,限度的节省实验经费。
(名称)注意事项:
收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在 4 ℃ 备用,如有特殊 原因需要周期收集标本,
将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。标本 2 -8 ℃ 可保存 48 小时, -20 ℃ 可保存 1 个月。 -70 度可保存 6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
液体类标本:
标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。 1ml 的 全血可得到 0.5ml 的血清或血浆。每个标本量收集体积= 100ul × 检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
血清:
室温血液自然凝固 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
血浆:
应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入 10 %( v/v )抗凝剂 ( 0.1M 柠檬酸钠或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分钟后,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形 成,应再次离心。
尿液、胸腹水、脑脊液:
用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。检测细胞内的 成份时,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀
释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS ,缓冲液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制剂或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀
浆充分。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
上海恒远生物科技有限公司主要供应进口ELISA试剂盒、血清、抗体、金标试剂盒、生物试剂、培养基、一抗、二抗等产品,是一家专门从事生物技术相关产品研发和销售的综合性生物科学公司,产品畅销国内大部分地区。公司专注于高品质ELISA试剂盒的整合和研发,打造国内,*优的ELISA试剂盒,希望公司的ELISA试剂盒能为国家科研做出卓越的贡献。
上海恒远生物科技有限公司将以*卓越的品质和*周到的服务竭诚为您服务!
“名称”7折优惠促销,国内*具权威的“名称”供应商,试剂盒原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
(名称)液体类标本:
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1、血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2、血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3、尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4、细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
测试剂盒检测原理
ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗体,这些抗体就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗体elisa试剂盒 的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性
上海恒远生物科技有限公司主营产品:ELISA试剂盒、放免试剂盒、金标试剂盒、抗体抗原、血清、生化试剂、各种酶类、分子生物学试剂盒、培养基等。此外,上海恒远生物科技有限公司与国内很多的企业都建立了长期的友好合作关系。还代理经营进口品牌Amresco,R&D,sigma,Santa cruz,wako,omega,ATCC,ScienCell,Bioworld,Spectrum等世界知名产品。本着“信誉、质量、品牌、诚信为本”的理念,上海恒远生物科技有限公司以优良的服务质量和实惠的价格,为公司赢得了广大的市场。
RD“名称”,质量可佳,价格合理,含税含运费,我们保证对所售任何产品一概负责到底,每一份实验结果都真实可靠!
(名称)说明书Elisa试剂盒价格,上海恒远生物科技有限公司等全国各地现货供应
主要成分:酶标板,试剂,标准品等
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。
利用ELISA进行临床检验常见的样本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。欢迎来电咨询订购此产品。
(名称)操作步骤:
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
上海恒远生物科技有限公司 超低价 提供各种种属各种系列ELISAkit酶联免疫检测试剂盒。 主要用于科研方面,不用于临床诊断。可以用于检测各种指标。
公司主要品牌:Omega、Sigma、R&D、Amresco、HYCLONE、Spectrum、NQBB等
主要产品:ELISA试剂盒、生物试剂、抗体、对照品、血清、培养基等,公司产品几乎涉及所有领域,代表了品质。
各种种属有:人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊;植物。
标本齐全:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水等等;
有售出产品保证产品质量,提供完善售后服务.
(名称)公司提供免费代测服务,一周内出结果,保证质量,含税含运费,欢迎来电咨询。
(插入名称)详细说明书
【注意事项】
1. 从-20℃取出的试剂盒,在4℃解冻过夜。盒内每一瓶解冻的溶液在开启瓶盖之前都要轻轻摇匀,避免解冻时出现的分层,否则会出现浓度不均一的现象。
2. 开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
3. 配制各种试剂时,切记混匀!
4. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
5. 建议所有猪IL-1β标准品、样本都做双份检测。
6. 要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活!
7. 为免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和试管。
【洗板方法】
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的PBS或TBS洗涤缓冲液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
【样品的准备和保存】
样品如果不立即分析,应分装后冷冻保存,且避免反复冻融。
血清——用干净试管收集血液,室温凝固2小时或4℃过夜,离心1000×g 10分钟,收集血清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
细胞培养、组织匀浆、体液——离心去除沉淀,立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
【样品稀释的一般原则】
用户须查阅文献了解标本内待测因子的含量,决定适当的稀释倍数,以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的*佳检测范围。样品的稀释应有详细记录。
【试剂准备和保存】
A. 猪IL-1β标准品的稀释和使用:在使用前2小时内准备。将冻干品管内加入1ml样品稀释液,彻底溶解后做倍比稀释。
稀释后的猪IL-1β标准品在2小时内使用。
B.生物素标记猪IL-1β抗体工作液:在使用前2小时内准备。
1. 根据每孔需要0.1ml计算总的用量(实际配制时应多配制0.1-0.2ml)。
2. 按10ul生物素标记猪IL-1β抗体加猪IL-1β抗体稀释液990ul的比例配制工作液。轻轻混匀。
C.亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)工作液的准备:在使用前1小时内准备。
1. 根据每孔需要0.1ml计算总的用量(实配时应多配制0.1-0.2ml)。
2. 按10ul亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)加ABC稀释液990ul的比例配制工作液。轻轻混匀。
D. TMB显色工作液的准备:在使用之前30分钟,按TMB显色液A 9份加 TMB显色液B 1份的比例配制TMB显色工作液。
【操作程序】
1. 确定本次检测所需的已包被猪IL-1β抗体的酶标板孔数目。
2. 将倍比稀释的猪IL-1β标准品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100ul每孔加入。
3. 酶标板加上盖,37℃反应90分钟。
4. 反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体;或甩去酶标板内液体,再对着吸水纸拍几下。洗涤2次。
5. 将准备好的生物素猪IL-1β抗体工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应60分钟。
6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗涤3次,每次浸泡1分钟左右。
7. 将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应30分钟。
8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗涤5次,每次浸泡1-2分钟左右。
9. 按每孔0.1ml依次加入TMB显色工作液,37℃避光反应,反应过程中,要经常的观察,当肉眼可见猪IL-1β标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔差别不明显时,即可加入TMB终止液0.1ml/孔。(显色反应*长不要超过30分钟)。
10. 用酶标仪在450nm测定O.D.值。
11. 根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了N倍,其实际浓度应该×N。
【操作程序总结】:
准备试剂,样品和猪IL-1β标准品
加入准备好的样品和猪IL-1β标准品,37℃反应90分钟
洗板2次,加入生物素化猪IL-1β抗体工作液,37℃反应60分钟
洗板3次,加入ABC工作液,37℃反应30分钟
洗板5次,加入TMB显色液,37℃反应
加入TMB终止液
30分钟之内读OD值
计算标本待测因子含量
【检测范围】:1000pg/ml→15.6pg/ml。
【敏感性】: <5pg/ml
【特异性】: 系统和其它细胞因子无交叉反应。
【保存】: -20℃ [短期内(如两周)可4℃]
【有效期】: 12个月(-20℃)。
【用途】: 用于体外定量分析液体标本(通用型)。
上海恒远公司提供各种种属、各种系列ELISA检测试剂盒,仅限于实验室科学研究用,不适用于临床诊断。
【产品名称】:
【敏感性】: <5pg/ml
【特异性】: 系统和其它细胞因子无交叉反应。
【保存】: -20℃ [短期内(如两周)可4℃]
【有效期】: 12个月(-20℃)。
【用途】: 用于体外定量分析液体标本(通用型)。
标本收集:
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA,标本采集后30分钟内于 1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂标本。
3. 其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测
4. 标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。
5.标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃电冰箱内,避免反复冻融,1-6月内检测,4℃保存的应在1周内进行检测。
6. 如果您的样本中检测物浓度高于标准品值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。
试验所需自备物品:
1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl
3. 37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水
4. 吸水纸
检测前准备工作:
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶完全溶解后再配制洗涤液。(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
3. 标准品: 加入标准品&标本稀释液1.0ml至冻干标准品中,静置10分钟,待其充分溶解后,轻轻混匀(浓度为5000 pg/ml)。然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)。建议配制成以下浓度: 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。样品稀释液直接作为空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的EP管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
4. 生物素化抗体工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μl/孔计),实际配制时应多配制100-200μl。使用前15分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。
5. 酶结合物工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μl/孔计),实际配制时应多配制 100-200μl。使用前15分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。
洗涤方法:
1. 自动洗板机:每孔加入洗涤液350μl,注入与吸出间隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350μl,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。
1、 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2、 弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。
3、 弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
4、 每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。
5、 弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
6、 每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。
7、 每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
8、 立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
9、 实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。
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“产品名称” 现货供应,多年专业酶免服务,质量保证,免费代测。
规格:48孔/96孔
保存:2-8°半年
性状:液体
作用:科研试剂
价格,说明书欢迎来电索取!
试剂盒性能
1. 灵敏度:*小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
结果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IL-1标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IL-1含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
ELISA质量保证是一个复杂的过程,许多重要的环节都影响到检测的质量
一、方法学的影响
ELISA测定模式包括以下几种:双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞争抑制法,其中竞争抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作时差所引起的不公平竞争等因素的影响,结果重复性较差,质量较难控制。
二、试剂因素
不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量完全一致,即使是通过批批检的项目其检测结果也存在差异,因此必须选择和订购长批号的试剂,并保证保存条件。严格执行这一标准可以避免因试剂批号改变而重新建立质控体系及重新评估试剂的复杂过程,并且能够保证结果的稳定性;对于效期短、使用率低的试剂,应当小量分装,每次使用则取分装部分即可,避免反复冻融造成试剂的失效。
三、样本因素
标本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素,前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等,后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等。
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(插入名称)规格:48T/96T
ELISA的方法类型和操作步骤如下:ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
(一)双抗体夹心法
双抗体夹心法:是检测抗原*常用的方法,操作步骤如下:
(1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。
(2)加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
(3)加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
(4)加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。
根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。
(插入名称)操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在、第二孔中分别加标准品100μl,然后在、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为9U/L,6U/L,3U/L,1.5U/L,0.75U/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行
每个试剂盒操作是不同的,请按说明书操作。具体事项请来电咨询!
“名称”含税含运费,促销进口试剂盒,RD试剂盒,我司全面提供免费代测服务,用于试剂盒生产的抗体全部美国进口。
(插入名称)特点:1.准确度高,灵敏度高,特异性强2.检测时间短3.操作简便4.安全可靠,欢迎咨询。
规格:96T
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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产品名称:
检测范围:来电咨询
样品形式:血清/血浆/细胞培养上清/其它生物液体(具体情况请咨询)
保存与运输:短期4℃/长期-20℃保存
应用范围:科研用检测试剂注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
人常见ELISA试剂盒系列
人:IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2R、IL-27、IL-23、IL-17、IL-18、IL-9、IL-8、IL-6、IL-5、IL-4、IL-2、IL-13、IL-11、IL-10、IL-12P70、IL-12P40、IFN-ω、IFN-β、IFN-α、 IFN-γ、TNF-β、TNF-α、sICAM-1、LEP、MMP-3等
大鼠常见ELISA试剂盒系列
大鼠:TNF-α、IL-1β、IL-7、IL-32、IL-21、IL-27、IL-23、IFN-γ、TGF-α、TGF-β1等
小鼠常见ELISA试剂盒系列
小鼠:IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-13、IL-10、IL-11、IL-17、TNF-α、TNF-β、VEGF、TGF-β1等
另有兔、猪、猴、鸡、鸭、羊、植物等多种种属ELISA试剂盒,所有试剂盒经过充分验证,保证有效且重复性佳。
另外,本公司6.5折优惠活动中:
活动一:凡在我司购买elisa试剂盒一盒的客户,均可享受原价7.5折,购买elisa试剂盒三盒以上的客户,均可享受原价6.5折,以此类推,量大从优,还可获得我司送出的精美礼品一份
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公司名称: 上海恒远生物科技有限公司
联系人: 王经理
(插入名称)适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本,灵敏度极高。
(产品名称)
ELISA的概念、原理、操作步骤
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。
(一) 原理
ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
(二) 操作步骤
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,*后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法"的4、5、6。
(插入名称)适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本,灵敏度极高。
(产品名称)
(三) 试剂器材
1. 试剂
(1) 包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):
NaCO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸馏水至1000ml
(2) 洗涤缓冲液(PH7.4 PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸馏水至1000ml
(3) 稀释液:牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 加洗涤缓冲液至100ml 或以羊血清、兔血清等 血清与洗涤液配成5~10%使用。
(4) 终止液(2M H2SO4):蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。
(5) 底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml 0.1M 柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸馏水50ml。
(6) TMB(四甲基联苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml无水乙醇) 0.5ml底物缓冲液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl
(7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg 底物缓冲液(PH5.5) 1ml 3%H2O2 2μl
(8) 抗原、抗体和酶标记抗体。
(9) 正常人血清和阳性对照血清。
2. 器材:
(1) 聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。
(2) 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。
(3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。
(产品名称)
(四) 注意事项
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的*适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值而蛋白量*少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法"(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入
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产品说明
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保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
适用标本:血浩、血桨、细胞焙养上清液、组织匀桨等
主要用途:科研检测
原理:双抗夹心法
本公司郑重声明:
请客户在取材前尽量先与我公司销售技术人员沟通,前期的取材直接影响到您的实验结果。我们有成套的售前售后服务,凡不是在我公司购买的ELISA产品,恕我公司概不负责售后服务。
样品类型(SAMPLE TYPES):
标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清
或血浆。每个标本量收集体积=100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
样品采集:
收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,
将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分
激素类标本需添加抑肽酶。
注意事项:
收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在 4 ℃ 备用,如有特殊 原因需要周期收集标本,
将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。标本 2 -8 ℃ 可保存 48 小时, -20 ℃ 可保
存 1 个月。 -70 度可保存 6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
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原创作者:上海elisa生物技术有限公司
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