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用于临床检验的 ELISA 主要有以下几种类型：

（一）双抗体夹心法 

1、双抗体夹心法检测抗原         

操作步骤如下： 

1）将特异性抗体与固相载体结合，形成固相抗体。洗涤除去尚未结

合的抗体及一些杂质。 

2）加入待测标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。 

3）加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。 

4）加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原，例如 HBeAg、HBsAg、hCG 、AFP等。只要获得针对受检抗原的特异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清，包被和酶标所使用的抗体分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。

（人高分子量细胞角蛋白试剂盒

）孵育可能碰到的问题:

1、孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底；

2、孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。 

相应解决办法：

1、贴封片或加盖；

2、按说明步骤严格控制操作时间。

洗板可能碰到的问题:

1、采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉;

2、采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不彻底；洗板针堵塞，抽吸不完全；洗板不畅，导致洗板效果差;

3、反应板过多造成洗板等待时间长。

相应解决办法：

1、保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；

2、合理安排，或多用几台洗板机。

显色可能碰到的问题:

1、显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；

2、加显色剂时溅出孔外造成液体回流。

相应解决办法：

1、显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用；

2、加样时保持显色剂不外流；

3、A、B液应避免接触金属器械。

（人高分子量细胞角蛋白试剂盒）终止可能碰到的问题:

加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。

相应解决办法：

加终止液时应避免产生气泡。

读板可能碰到的问题:

读板时板底不清洁

相应解决办法：

应保证酶标板清洁。

试验全过程：1、整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 

2、实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。 

产品具体详情请来电咨询本司业务员，或登录我司官网： 

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原创作者：上海elisa生物技术有限公司