相关培养基的实验我们在前面的文章中说到过不少,其实实验也会分很多种的,不光是有实验室的,也还有其他的方法的。我们今天来分享一个新的实验,您来看培养基的消毒与灭菌过程是怎样的。
所需物品:吸管、培养皿、试管、电热干燥箱,手提试高压蒸汽灭锅,牛肉膏蛋白胨培养基、蒸馏水。
操作步骤:
1、干热灭菌法:适用于空的、干燥的玻璃器皿的灭菌。培养基不适用。
① 将包好的待灭菌物品放入电热干燥箱,关好箱门。
② 接通电源,打开排气孔,使箱内湿空气能逸出,旋动恒温调节器,保持加热升温状态,至箱内达到100℃时关闭排气孔。
③ 当温度升到160~170℃时,借恒温调节器的自动控制,保持此温度2h。
④ 切断电源,冷却至70℃时,打开箱门,取出灭菌物品。
2、高压蒸汽灭菌
① 首先将内层锅取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角架相平为宜。
② 放回内层锅,并装入待灭菌物品,不要装得太挤,以免妨碍汽流通影响灭菌效果,三角瓶口不要与桶壁接触,以免冷凝水淋温包口的纸而透入棉塞。加盖,并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内,再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个棉栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。
③ 用电炉或其他方法加热,并同时打开排气阀,使水沸腾以排除锅内的冷空气,待冷空气排尽后,关上排气阀让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升,当锅内达到所需压力时,控制热源,维持压力至所需时间。
④ 停止加热,待压力表的压力降至零位时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品。注意:当压力不为零时,不能开盖取物否则由于压力突然下降,容器内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口,造成棉塞沾染而发生污染,甚至灼伤操作者。
⑤ 高压灭菌锅上的安全阀,是保障安全使用的重要机构,不得随意调节。
在以上中,我们说到额一个方法,也就是干热灭菌法,它是利用高温使微生物细胞内的蛋白凝固变性而达到灭菌的目的,细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白凝固越快,反之含水量越小凝固越慢。因此与湿热灭菌相比,干热灭菌所需温度高(160~170℃),时间长(1~2h)。
而相对来说,高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放入一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅内水沸腾产生蒸汽,水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于水蒸汽不能溢出而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点升高,得到高于100℃的温度,导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
今天又是本周的*后一个工作日啦,这个星期过得是非常之快啊,您在本次实验中也要注意到很多的细节问题。上海劲马的产品质量您放心!现在购买是七折的,需要的朋友来电给我公司业务员。