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阅读次数:762 发布时间:2013/6/5 9:18:29
劲马公布白介素6(IL-6)的*新诱生条件及原理
IL-6来源于单核细胞、成纤维细胞、膀胱癌细胞、骨肉瘤细胞等。IL-6是B细胞增殖和分化过程中起调节作用和诱导B细胞分泌的必需因子。【结果判断】1. 多发性硬化(MS)患者脑脊液中IL-6水平明显升高,且与脑脊液中的细胞数、总蛋白、IgG均有显著相关。
ID6由多种淋巴类和非淋巴类细胞产生,具有多种生物学功能,在机体的免疫应答、骨髓造血及炎症反应中均起重要作用。
机体多种组织细胞如单核一巨噬细胞、T、B淋巴细胞、成纤维细胞、肝细胞、血管内皮细胞和某些肿瘤细胞系均可产生IL-6(一些患者血清中也含有IL-6),可根据实验目的选择。
1.天然样品 人血清经56~C30min灭活后可用于检测IL-6:
2.PHA诱导人外周血淋巴细胞 PHA刺激人外周血淋巴细胞培养3d后,收集细胞培养上清。
3.LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞 将小鼠腹腔巨噬细胞调整成2X106/mL,加人终浓度为20ug/mL的LPS,培养48h后收集细胞培养上清。
4.小鼠脾淋巴细胞 将小鼠脾淋巴细胞调整成5X106/mL,培养24h后,收集细胞培养上清。小鼠脾细胞可自发产生IL-6,或加入终浓度为3ug/mL的ConA作为诱生剂。
概述
白细胞介素或白介素(interleukin,IL)是一组细胞因子(分泌的信号分子)。*早发现在白细胞中表达作为细胞间信号传递的手段。实际上,白细胞介素可以由多种细胞产生。免疫系统的功能,在很大程度上依赖于白细胞介素。一些罕见的白细胞介素缺陷不足都常出现自身免疫性疾病或免疫缺陷。IL-6是一种分子量为26kD的蛋白质,由184个氨基酸组成。*初人们只发现其在白细胞中合成并在白细胞间发挥作用而命名。随研究的不断进展,人们逐渐发现不仅激活的淋巴细胞、单核巨噬细胞可以合成和分泌IL-6,而且骨髓细胞和部分肿瘤细胞等也可以产生IL-6。其作为一种机体在免疫应答中产生的重要介质,具有多种生物学活性。IL-6是一种多效性细胞因子,能调节多种细胞功能,包括细胞增殖、细胞分化、免疫防御机制及血细胞生成等。IL-6与多种肿瘤发生、发展关系密切,它通过干预细胞的黏附性 和活动力、血栓形成、肿瘤特异性抗原的表达及肿瘤细胞的增殖,从而影响肿瘤的进展。它还能调节多种细胞功能,包括细胞增殖、细胞分化、免疫防御机制及血细胞生成等。实验原理 用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗IL-6抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-6抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的IL-6呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
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