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阅读次数:1086 发布时间:2013/3/21 10:17:29
免疫组化一抗的选择要点和技巧
一抗选择的好坏对免疫组化实验的至关重要,但作为新手,这方面欠缺经验,另外由于实验室经费限制,纠结和徘徊在国产抗体与进口抗体之间,不知道一抗选择有哪些技巧呢?以下就是我能帮助大家快速买到想要的抗体。
要点:一抗二抗都是一种可以特异结合别的东西的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)
抗体选择首先考虑你需要染得的组织或细胞的来源,其次考虑在染色中需要不需要抗体双标,明确了这一点后,就可以考虑你所需要的抗体的来源。在购买抗体的时候,如果你需要标记的蛋白是比较稳定、表达量比较高或者说是已经非常常用的蛋白,那么可以考虑国产的抗体,如中杉或者博士德。如果是比较新的蛋白,或者是不太清楚的蛋白表达量的,建议你用进口的抗体,如abcam、cell signal、sata等,进口的抗体中sata的抗体比较便宜,但是用过后老是觉得抗体效价一般。
一抗尽量选择单克隆抗体,还要注意其抗体来源(兔抗、鼠抗或者其他)要与二抗匹配。至于进口还是国产我觉得要看是什么组织,当然大多数情况下还是进口的好一点,也可以咨询一下做相关组织的人。感觉组化不难,不过要多交流,染出来和染得好需要不断的总结经验,根据不同的组织要求不断调整。
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