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细胞消化胰酶的配制

阅读次数：825 发布时间：2012/10/16 10:30:28

对一般细胞 0.25% 胰酶（胰蛋白酶，Trypsin）
配方：100ml PBS,0.25g胰酶
步骤：1先配100mlPBS（1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O
/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水）
2 称胰酶0.25g
3 加入PBS中，低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜
低速搅拌0.5h冰浴中
4 调PH7.4
5 仍在冰浴中
6 过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完
tip:低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫，
酶就变性了。低温，防止酶失活
对难消化的细胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA（0.02%）
tip:因为EDTA可以络合Ca2+，增加消化效力