zui近在统计产品销售情况时,根据客户的技术咨询,整理出进口抗体试剂zui新常见问题分析总结:
一、问:用于免疫接种的抗原应如何制备呢?"
答:抗原应溶解在缓冲溶液。不溶性抗原和可溶性的一样好。理想的抗原浓度是1mg/ml,然而较低浓度也可以接受的。您也可以把含有目标蛋白的SDS-PAGE胶发给我们,将胶放于水中变脱色,因为醋酸能使得蛋白质进一步地变性。
对此,还要注意避免:对动物有毒的添加剂。可接受:低量的SDS、咪唑、尿素、胍,非离子型去污剂,EDTA或EGTA和聚丙烯酰胺。添加的zui终的量在很大程度上取决于样本体积/抗原浓度。
老师继续问道:“选择哪个物种用于免疫接种?"
使用IgG和IgY抗体针对同一抗原的优势:①独立确认预期的目标蛋白质被检测。②抗体库具有不同的特性,在不同的技术中能起到互补的作用双重染色。③一般从遗传角度上选择与抗原有较远的亲源关系的物种用于免疫接种。
二、问:在兔子中生产的抗体比那些在鸡中生产的更好吗?
答:生产抗体的过程是抗原,特异动物免疫反应和测试的结合。如哺乳动物的保守靶标蛋白,我们推荐使用在鸡中生产的抗体。因为他们在进化上亲缘关系更远,进 口抗体试剂且他们的免疫系统与保守的哺乳动物蛋白反应更好,而这些保守哺乳动物蛋白可能不会被山羊或兔子的免疫系统识别。
三、问:如何储存抗体?
答:血清中的抗体,对于抗体这是一个非常稳定的存储形式。在-20℃或-70℃的血清通常可以保存多年。在一些特殊的情况下,anti-peptide抗 体储存的时间更短。短时间可以储存在4℃。在某些情况下操作要更加小心,*步在-20℃冷冻,之后放于-70℃冷冻的效果更好。
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