12月6日，我公司与南通大学顾老师合作成功，在顾老师收到试剂盒产品之后致电给我司夏经理咨询产品的使用问题。在夏经理的安排下，当日下午，上海劲马技术部的欧阳博士为客户细说elisa试剂盒实验：“主要还是参照说明书的内容，不过有些地方还需要注意。在产品使用之前，您首先要做的是把所有的试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡。这一步骤是要避免产生加样上的误差。”

随后顾老师问道：“那么样品的稀释需要怎样做呢？”

欧阳博士答道：根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

在450nm波长处测定各孔的OD值。