若是不了解一项实验的原理又怎么去深入的了解实验目的、性质呢?在试剂盒方面,我公司作为上海金牌供应商,拥有数名专业的实验技术人员,可提供免费技术指导及代测服务!下面我们就一起来看看今天的重点内容:上海elisa试剂盒公司解说测定的原理。
我们常提到的ELISA实则是酶联接免疫吸附剂测定的简称,继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。
ELISA试剂盒在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法ELISA试剂盒价格以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。白介素ELISA试剂盒比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
·夹心法原理:
用特异性抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的抗原会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的特异性抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。生物素化的特异性抗体与结合在包被抗体上的抗原结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,抗原浓度与OD值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中抗原的浓度。
ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。ELISA试剂盒由于抗原、抗体的反应在一种固相载体——聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,ELISA试剂盒每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,ELISA试剂盒从而保证试验结果的特异性与稳定性。
·怎样处理elisa实验结果?
1. ELISA实验中样品都要做复孔或三孔,然后计算每个浓度标准品的平均OD值,复孔的变异系数应该小于20%。
2. 平均OD值减去空白孔的OD值。
3. 制作标准曲线。
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