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技术文章

细胞培养无菌操作要点

点击次数:235   发布时间:2022/5/13 10:15:39

 细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。以下是细胞培养无菌操作的基本要点,一起来学习下吧。

 

1.实验,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌,用70%酒精擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风机运转10分钟后,才可开始实验操作,每次操作只处理一株细胞,以免造成细胞交叉污染,实验结束后,将实验物品带出工作台,如需要继续进行下一个实验,则用70%酒精擦拭无菌操作台面,再让无菌操作台风机运转10分钟后,才可进行下一个实验操作 

 

    2.无菌操作工作区域应保持清洁与宽敞,必要物品,如试管架,移液器或吸管头等可以暂时放置,其它实验用品用完后应及时移出,以利气体流通,实验用品要用70%酒精擦拭后才能带入无菌操作台内,实验操作应在操作台中央无菌区域内进行,勿在边缘非无菌区域操作 

 

    3.小心取出无菌实验用品,避免造成污染,切勿碰触吸管与吸头头部或容器瓶口,不要在打开的容器正上方操作实验,容器打开后,用手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放在台面上

 

    4.工作人员应注意自身的安全,必须穿戴实验衣与手套后才进行实验,对于来自人源性或病毒感染的细胞株应特别小心,并选择适当等的无菌操作台(至少两),操作过程中,应避免引起气溶胶的产生,小心有毒性试剂,例如DMSOTPA等,并避免尖锐物品伤人等

 

    5.定期检查下列项目,CO2钢瓶内的CO2压力,CO2培养箱内的CO2浓度,温度,及水盘是否有污染,无菌操作台内气流压力是否正常,定期更换紫外灯管及HEPA过滤器滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000小时/HEPA

 

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原创作者:上海elisa生物技术有限公司

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