人需要消化,细胞也是需要消化的,那细胞消化的方法你知道几种?和小编一起来看看吧!
一、离子螯合剂:不破坏细胞表面分子,仅与CAMs螯合,因此,如果检测细胞表面分子的话,尽量,甚至是一定不要用酶消化法。
1、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。
2、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。
二、物理法:直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。
三、冷冻法:
此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。
优点:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。
具体过程是:
1.用较多的4度的PBS洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔)。
2.再加0.5ml 4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落。
3.轻轻吹打,细胞即脱落。
4.按一定比例传代。
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