细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板（血球计数板）进行。实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
一、实验步骤：
1.制备细胞悬液：对于悬液培养的细胞，可直接进行下面的步骤2（计数与计算过程）。如果计数对象为贴壁生长的细胞，先需将培养物按如下步骤制备成细胞悬液。
①终止培养，将培养液吸出，用PBS洗培养物一次。
②给培养瓶内加入1ml 0.25％胰蛋白酶溶液，于37℃消化3～5min 。期间不断在镜下观察。当细胞变圆接近脱壁时，弃消化液。
③加入一定量的培养液（如果这些培养细胞不再有用，可加PBS），用吸管吹打，使细胞脱壁而制成细胞悬液。
2.计数与计算过程
①在细胞计数板中央放置计数用的盖玻片。
②用玻璃虹吸管吸取细胞，让虹吸管在盖玻片上或下侧的计数板凹蹧处流出悬液，至盖玻片被液体充满为止。
③置显微镜下计数四角大方格内的细胞总数。对于压线的细胞只计数在上线和左线者，对于细胞团按单个细胞计数。
④按下式计数细胞悬液的密度：细胞密度＝（4个大格细胞总数/4）×104个/ml 。
二、注意事项：
①务必使分散成单个细胞，取样计数，充分混匀细胞悬液。
②显微镜下计数时，遇到2个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算。如果细胞团>10％，说明细胞分散不充分。
上海劲马实验通过多年探索、积累经验、积推广，凭借业的销售团队、细致的售售中售后服务和高质量的产品获得高校/医院/科研院/第三方检测中心的信任。如果您近期有实验方面需求，欢迎来电咨询订购！
原创作者：上海elisa生物技术有限公司
