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技术文章

劲马生物|抗原和抗体在ELISA实验中具体有哪些反应呢?

点击次数:148   发布时间:2023/8/9 15:25:33

一、抗原和抗体都具体反应的可逆性

Ag·Ab的解离程度与K值相关。具有高亲和力的抗体抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合起来非常的牢固,不易解离。解离后的抗原和抗体都能保持到原有的结构和活性,因此可以用亲和层析法来提纯抗原和抗体。在抗血清中,特异性的IgG抗体仅占总IgG中的小部分。用亲和层析法来提取的特异性抗体,称为亲和层析纯抗体,用在免疫测定当中可以得到更好的效果。

二、抗原抗体具体反应的适比例

在恒定量的抗体中加入递增量的抗原形成抗体复合物(沉淀)的量。曲线的高峰部分是抗原抗体比例合适的范围,称为等价带。在等价带后的分别为抗体过剩带和抗原过剩带。如果抗原和抗体度过剩,就不会有沉淀物形成,在免疫测定中称为带现象。抗体过量称为带,抗原地过量称为后带。在用免疫学方法测定抗原时,应使反应系统中有足够的抗体量,如果没有足够的抗体量则测得的量就会小于实际的含量,就可能会出现假阴性的情况。

三、抗原抗体具体反应的特异性
抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上有着互补的关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。例如乙肝病毒中的表面抗原、e抗原和核心抗体,其来源于同一种病毒,但仅与其相应的抗体相结合,而不与另外两种抗体产生反应。抗原抗体反应的这种特异性使免疫测定能在非常复杂的蛋白质化合物中测定某一特定的物质(如:血清),而不需要先分离待检物。但是这种特异性也不是绝对的,就好比两种化合物有着部分相同的结构,那么在抗原和抗体反应中就会出现交叉反应。
【例如:绒毛膜促性腺激素(HCG)和黄体激素(LH)均由α和β两个亚单位组成,其结构的不同处在于β亚单位,但两者的α亚单位是同类的。用HCG免疫动物所得的抗血清中含有抗(α-HCG)和抗(β-HCG)两种抗体,抗(α-HCG)抗体将与LH中的α酶位发生交叉反应。在临床检验中,如用抗HCG抗血清作为诊断试剂检定尿液中的HCG,就只能用于HCG浓度较高的试验中,否则妇女生理性排泄入尿液中的微量LH 将与之发生交叉反应。因此在作为早孕诊断(敏感度应达到50mIu/mlHCG)的实际中必须应用只对HCG特异的抗(β-HCG),以避免与其它激素的交叉反应的发生。】

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原创作者:上海elisa生物技术有限公司

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