ELISA试剂盒的选择对于ELISA实验很重要,在选择符合科研要求的同时并且要求高品质的ELISA试剂盒,使实验结果更标准,那么在ELISA实验之该如何选择合适的试剂盒呢?劲马生物为你总结,一起来看看吧!
1 查找待测样本的蛋白浓度
通过检索SCI文献、Genecards、Mayocliniclabs等,获得目标蛋白的表达部位及表达浓度参考值,比较ELISA试剂盒中给出的样本测值与参考值是否一致。
2 明确试剂盒的应用种属检测的样本类型
不同厂家验证的样本类型不同。除试剂盒特别说明外,一般情况下,不同种属不能通用。常见待测样本类型有:血清、血浆、细胞上清、组织匀浆、细胞裂解液等。实验,需要判断试剂盒能否满足目标物种的目标蛋白检测。
3 明确试剂盒的检测范围
试剂盒的检测范围即标准曲线范围。标准曲线范围不等同于样本浓度范围,所以,要特别注意判断待测样本浓度是否落在标准曲线范围内。对于浓度很高的样本,建议先通过预实验,摸索出合适的稀释倍数后,再大量测定样本。
4 明确试剂盒的质控标准
Ⅰ 稀释线性
一般指样本稀释线性,即:将样本梯度稀释,看各稀释梯度浓度是否成线性;对于高浓度样本,建议选择OD值落在标曲范围中部的稀释倍数为合适的稀释倍数。
Ⅱ 回收率
评估试剂盒测量结果趋于真实值程度的指标。一般添加标准品(重组蛋白)到天然样本基质内,进行测定。通常,线性及回收率的范围在80%-120%比较合适。
Ⅲ 天然样本检测
确保试剂盒可以检测天然样本及合适的样本类型。可根据靶蛋白性质对天然样本进行选择,例如:血清、血浆、细胞上清、尿液、唾液和乳汁等。
Ⅳ 交叉反应
通过交叉反应评估试剂盒的特异性。交叉反应越小,说明试剂盒的特异性越好。
①与同家族其他蛋白或结构类似物的交叉反应。
②与其他种属相同靶点蛋白的交叉反应。
③与血清中常见因子的交叉反应。
Ⅴ 干扰试验
判断其他分子与抗原-抗体对之间相互作用的影响。干扰性越大,待测物测定值越不准确。
①评估靶蛋白配体的干扰。
②评估靶蛋白受体的干扰。
Ⅵ 稳定性
判定试剂盒在规定条件下储存时间长短的标准。一般通过热加速稳定性实验验证。
①将试剂盒在37℃条件下放置7天,与4℃条件下放置的相同产品进行比较。
②各项性能检测结果的偏差均应<15%。
Ⅶ 精密度
试剂盒重复实验时,误差大小的评估标准。通常用CV表示。一般情况下,批间、批内变异系数(CV)均应<15%。
Ⅷ 检测限
试剂盒灵敏度的判定标准。检测限的值越低,表明试剂盒越灵敏。如果待检指标含量很低,需要选择高灵敏度的ELISA试剂盒。
5 选择业品牌ELISA试剂盒
选购试剂盒时,我们要尽量选择品牌知名度高,在确保产品质量过关的同时,还能获得更业的售售后服务。
6 选择性价比高的产品
预算也是选购ELISA产品的要素。在确保试剂盒质量可靠的情况下,选择性价比高的产品。生物学是其严谨的科学,实验结果的准确性是项目基金、文章等评审必不可少的因素。
劲马生物拥有一批技术精湛、经验丰富的技术工程师,经过多年积累,试剂盒现已涵盖种属甚多,上千余种指标,有快速、简单、准确的特点,迎合了广大高校和科研人员的需求,大的提高了科研人员的工作效率,成熟稳定的质量,赢得了众多科研机构的认同,完善的库存及供应体系以及稳定的技术指导,并且产品均能现货供应。期待您的来电。
劲马生物ELISA试剂盒优势:
1.高品质:高品质的抗体和试剂是ELISA试剂盒的基础;
2.准确特异:特异检测目标分子,结果准确可重复;
3.高度灵敏:可检测到pg/mL别的目标;
4.种类齐全:可覆盖人、大鼠、小鼠、兔、鸡、猪、犬等多个种属;
5.技术服务:包括售的标本收集,使用过程中不明白的地方,实验结束后的数据分析!还有培训、委托加工、定制等;
6.免费代测:您只需把标本寄过来,我们为您节省时间,帮您出结果,原始数据,分析数据均可提供,一般时间是5天左右;
7.质量:合同上注明了有质量问题免费包换,质量问题包括运输不当,客户在使用过程中测不出结果等等。
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