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技术文章

收到常温细胞后如何保存嘞?

点击次数:665   发布时间:2020/10/28 9:16:18

    细胞(英文名:cell)并没有统一的定义,比较普遍的提法是:细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成,但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。

    一般来说,细菌等绝大部分微生物以及原生动物由一个细胞组成,即单细胞生物,高等植物与高等动物则是多细胞生物。细胞可分为原核细胞、真核细胞两类,但也有人提出应分为三类,即把原属于原核细胞的古核细胞独立出来作为与之并列的一类。研究细胞的学科称为细胞生物学。

    细胞体形极微,在显微镜下始能窥见,形状多种多样。主要由细胞核与细胞质构成,表面有细胞膜。高等植物细胞膜外有细胞壁,细胞质中常有质体,体内有叶绿体和液泡,还有线粒体。动物细胞无细胞壁,细胞质中常有中心体,而高等植物细胞中则无。细胞有运动、营养和繁殖等机能。

    对于我们科研人员,当收到了常温的细胞,我们又应该如何操作呢?

    一、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。

    二、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量丛瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内趋置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。

    三、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

    四、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态;建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。

    五、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5m左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。

    六、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离 心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5m培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密,度达80%左右时再进行传代操作。

    *后温馨提示:可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中备用;细胞首次传代时,可以将该培养基按照一定比例和客自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。确认细胞状态良好后,应及时将部分细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失,影响后续实验。

原创作者:上海elisa生物技术有限公司

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