一、匀浆介质
一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定目标的情况自行设定浓度,意图是坚持样本的等渗环境。
二、安排匀浆的制备
1、取安排块（0.2g～0.5g）可到5～10mg在冰冷的PBS中漂洗，滤纸拭干，精确称重，放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:4的比例参加4倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎安排块。
3、匀浆的方式：手艺匀浆，机器匀浆。
① 手艺匀浆：左手持匀浆管将下端刺进盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直刺进套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充沛研碎，制成20%的匀浆液。
② 机器匀浆：用安排捣碎机10000～15000 转/分 上下研磨制成20%安排匀浆，也可用内切式安排匀浆机制备（匀浆时刻10秒/次，间隙30秒，接连3～5次，在冰水中进行,可适当延伸匀浆时刻），
4、将制备好的20%匀浆液用一般
离心机或低温低速离心机4000转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定.
三、样本保存:
植物安排样本暂时不测定，可立即低温冻存，温度越低越好，中心如不重复冻融，-20℃以下可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。 制备好的匀浆液建议不要冻存,当天进行测定,如放置时刻过长相关酶活会有所下降,部分目标4℃可寄存3～5天(如SOD要寄存2～3天,MDA可寄存3～5,总蛋白测定可存5～7天。
原创作者：上海elisa生物技术有限公司
