主营产品:

elisa试剂盒,上海elisa试剂盒,北京elisa试剂盒,进口elisa试剂盒,国产elisa试剂盒,酶联免疫试剂盒,生物试剂和微生物培养基等
服务热线:

13817140470

联系我们/CONTACT US

联系人:张经理

电 话:13817140470

手 机:13817140470,13296071817

地 址:上海市松江区漕河泾研展路455号B座

邮 编:201615

传 真:021-64881400

邮 箱:2885635536@qq.com

阿仪网商铺:http://www.app17.com/c76415/

技术文章

血清对ELISA测定的影响因素

点击次数:652   发布时间:2019/8/14 8:51:05

 就血清对ELISA测定的影响做如下讨论。
 
    血清是常用的ELISA标本,血浆一般可视为与血清同等的标本,标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致,分为内源性物质和外源性物质两种:
 
    1. 内源性物质 有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不同程度影响检测结果。进口elisa试剂盒常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig(s)抗体、交叉反应物质和其它物质等。 
 
    2.外源性物质:在人类生活的外界环境中,可与机体接触后进入体内,并且有生物活性,导致一定生物学作用的化学物质,则称为外源性化合物,又称外来化合物。
    
    (1)类风湿因子 
    人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合,从而导致假阳性。
 
    解决该情况的办法是:
    ①用F(ab)2替代完整的IgG;
    ②标本用联有热变性(63℃,10 min)IgG的固相吸附剂处理(将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效);③检测抗原时,可以用2-巯基乙醇等加入到标本稀释液中,使RF降解。 
 
    (2)补体ELISA系统中固相一抗和标记二抗过程中,抗体分子发生变构,其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来,使C1q 可以将二者连接起来,从而造成假阳性。解决的办法是:①用EDTA稀释标本;②用53℃,10 min或56℃,30 min加热血清使C1q灭活。 
 
    (3)嗜异性抗体人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig(s)结合的天然嗜异性抗体,可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来,也能造成假阳性。解决的办法是:可在标本稀释液中加入过量的动物Ig(s),但加入量不足或亚类不同时无效。 
 
    (4)嗜靶抗原的自身抗体 抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体,有时能与靶抗原结合形成复合物,在ELISA方法中均可干扰抗原抗体测定结果。为避免以上情况出现,解决的办法是:测定前需用理化方法将其解离后再测定。 
 
    (5)医源性诱导的抗鼠Ig(s)抗体 临床开展的用鼠源性CD3等单克隆抗体治疗,用放射性同位素标记鼠源性抗体的影像诊断及靶向治疗等新技术,均有可能使这些病人体内产生抗鼠抗体;另外,被鼠等啮齿类动物咬伤的病人体内也可以产生抗鼠Ig(s) 抗体。这些病人ELISA测定时均可产生假阳性。解决的办法是:测定抗原时,在标本中加入足量的正常鼠Ig(s) ,从而克服由于上述原因造成的假阳性。 
 
    (6)交叉反应物质类AFP样物质等,是与靶抗原有交叉反应的物质。在用多抗测定抗原时对测定结果影响不大,但在用单克隆抗体测定抗原时,如果交叉抗原决定簇正好是所用单克隆抗体相对应的靶决定簇时,也会出现假阳性结果。 
 
    (7)进口ELISA试剂盒标本中其它成分的影响 血清脂质过高、胆红素、血红蛋白及血液粘度过大等,均对ELISA测定结果有干扰作用。 
 
    上海ELISA生物技术有限公司本着服务科研,以质量求生存,以信誉求发展的精神,精益求精,力求做到更好。全体员工孜孜不倦为国内科研事业单位以及高校等提供优质的产品服务!本公司优质ELISA试剂盒具有质量可靠,灵敏度好,更具有免费代测及技术指导服务,欢迎科研者来电详询!

原创作者:上海elisa生物技术有限公司

首 页| 公司介绍| 产品展示| 公司新闻| 技术文章| 联系我们| 客户留言

阿仪网 设计制作,未经允许翻录必究. 联系人:张经理 联系电话:13817140470 总访问量:6246164 管理登录

主营产品:elisa试剂盒,上海elisa试剂盒,北京elisa试剂盒,进口elisa试剂盒,国产elisa试剂盒,酶联免疫试剂盒,生物试剂和微生物培养基等

扫一扫,关注我们!

客服时间:(9:00-18:00)