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技术文章

细节决定实验成败,做ELISA标准曲线需谨慎

点击次数:1218   发布时间:2018/1/4 10:09:58

   俗话说,“泰山不拒细壤,故能成其高;江海不择细流,故能就其深。”三百六十行,无论做什么,细节都决定着成败!什么是细节?就是那些看似普普通通的,却十分重要的事情,一件事的成败,往往都是一些小的事情所影响产生的结果。elisa试剂盒实验也一样如此,每一个实验步骤都可能直接影响到实验的结果。在今天的文章中,上海劲马技术人员将讲解ELISA试剂盒做标准曲线时所要注意到的细节,一起来看下吧。

操作细节:
1.设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖您所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度*陡段,即曲线几乎成直线的范围内。
2.检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。
3.标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。
4.做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于
0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。
5.样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。
6.采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。

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1.极高品质—高品质的抗体和试剂是ELISA试剂盒的基础;
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