上海劲马实验设备有限公司是一家生物技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售及技术指导服务。日前,我司技术部负责人欧阳技术在给客户刘老师关于切片的清洗方法分析介绍到:为了防止一抗、二抗等试剂残留而引起非特异性染色,所以适当地加强清洗(延长时间和增多次数)尤为重要,一般要求在一抗孵育前的清洗是3 min*3次,而一抗孵育后的清洗均为5次*5 min。注意事项:
(1)单独冲洗,防止交叉反应造成污染。
(2)温柔冲洗,防止切片的脱落。可以选择用浸洗方式;
(3)冲洗的时间要足够,才能彻底洗去结合的物质。
(4)PBS的PH和离子强度的使用和要求。建议PH在7.4-7.6浓度是0.01 M。(中性及弱硷性条件(PH7-8)有利于免疫复合物的形成,而酸性条件则有利于分解;低离子强度有利于免疫复合物的形成,而高离子强度则有利于分解)。
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