在技术的热线中*常被提到的一个问题就是“需不需要对血清进行热灭活”的问题。人们通常通过在56°C加热30分钟的办法,来灭活血清中的补体,以及其中可能的微生物(比如支原体)的污染。加热灭活带来的问题是,血清中的氨基酸、维生素和生长因子等也会不同程度的被破坏。
Triglia and Linscott 的研究发现(1),胎牛血清中的补体含量很低,即使在未稀释的胎牛血清中,也观察不到溶血现象。另外37°C的加热能够有效灭活补体。所以对胎牛血清而言,并不需要通过专门的热灭活来灭活其中的补体。
早期的血清制备中的滤膜的孔径大于0.22um,不能有效的去除支原体的污染。热灭活可以去除支原体的污染。但是现在血清制备中的终端滤膜的孔径为0.1um甚至小到0.04um,所以血清中一般没有支原体的污染。
综合上面的观点,除非有特别的情况,标准厂家生产的胎牛血清一般不需要加热灭活。
需要说明的是,有些厂家生产的胎牛血清质量并不符合标准。没有灭活时细胞生长状态明显变差。所以如果您的胎牛血清来自一家可信度不高的厂家,那么为了安全起见,还是以加热灭活为好。
原创作者:上海elisa生物技术有限公司