上月中旬，贵州大学王老师在我司订购了小鼠免疫球M(IgM)elisa试剂盒。实验结束后，反映阳性对照、质控在内的所有板孔颜色均较淡。这是什么原因造成的?我司技术分析如下：1.试剂盒必须在有效期内使用， 超过有效期的产品可能会产生很弱的信号。
2.试剂盒没有按规定进行保存，受高温影响；
3.试剂、样品用前未平衡至室温
4.加入试剂的体积和时间有误， 移液器计量不准，吸嘴内水分太多或不清洁；
5.洗板及加样过程中，酶标受污染失活而失去催化显色剂显色的能力
6.孵育时间及孵育温度未达到要求 ，反应板放入培养箱时注意温度并及时调整。
7.洗板次数过多，或浓缩洗液稀释倍数不符合要求；洗涤冲击力太大。浸泡时间太长；
8.显色剂加量不足或顺序颠倒，或混合后加入；
9.底物作用时间不够；
10.蒸馏水水质有问题；
实验前检查试剂的组分及批号，确认试剂未过期。 不要将试剂盒长时间置于常温下，按使用规定储藏。
确定所使用的试剂体积正确，加入时间适当。 校正移液器，移液器与吸嘴配合要紧密吻合。移液不宜太快，排放应完全。
确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等，确认配制洗液的容器已洗干净，确认配制洗液的纯化水达到要求且未受污染。
孵育温度应控制在 37-38℃，孵育时间严格按照说明书操作。 保温期内不宜多开门，以免影响保温。
严格按说明书要求稀释浓缩洗液及洗板，减小洗涤冲击力，按说明书要求置留洗涤液时间和洗涤次数。
显色剂滴瓶垂直向下，持力均匀，滴速不宜过快，先加显色剂 A，后加显色剂B，不可将A、B液混合后加入
准确定时。
测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响。
原创作者：上海elisa生物技术有限公司
