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技术文章

用ELISA试剂盒做实验,你会分析结果吗?

点击次数:1233   发布时间:2017/4/24 10:26:23

    相信有的同学在做完ELISA实验之后,不知道怎么分析结果,然而整个实验*关键的就是结果的处理了。那么在今天的文章中,我司为您带来的是elisa试剂盒检测结果分析方法。
①:ELISA实验中样品都要做复孔或三孔,然后计算每个浓度标准品的平均OD值,复孔的变异系数应该小于20%。
②:平均OD值减去空白孔的OD值。
③:制作标准曲线。
    以减去本底后的OD值为X轴,标准品的浓度为Y轴,利用作图软件得出一个合适的计算方法。建议使用合适的软件来作图,比如CurveExpert 1.4。这款软件能够给出很多种方法(比如直线、半对数、对数、四参数方程等)并从中选择一条*合适的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据吻合,可以将标准品的浓度作为未知数,将对应的OD值带入该方程,计算出标准品的浓度,得到的结果应该与实际浓度很接近(+/-10%)。选择拟合度的那条曲线。
    如果出现标准曲线的线性不好,或平行性不好(双孔对照孔的OD值差别很大),或出现跳孔的现象,可能引起的原因有酶标板孔间相互污染、洗板后未能尽快进行下一步操作、添加样品或其它试剂时操作的方法不对、孵育位置避光性不佳或盖板膜没有密封好使得水分蒸发、酶标板孔问加入的试剂量不同,相对应的解决办法是加样时请小心勿将液体溅人另一孔中,人工洗板时也请小心,勿将洗涤液溅人另一微孔中、在洗板后及时进行下一步操作、添加试剂时请悬空滴入,切记勿将枪头接触到板孔内,吸取不同试剂瓶中的液体时就要更换一次枪头、确认孵育环境不透光,盖板膜将酶标板密封好、使用已校正过的微量加样器,如将次加入液体时枪头上留有一滴的液体滴下,那么将以后枪头上留有的液体也滴下,以保证加入液体体积的一致性。

原创作者:上海elisa生物技术有限公司

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