联系我们/CONTACT US

联系人：张经理

电话：13817140470

手机：13817140470，13296071817

地址：上海市松江区漕河泾研展路455号B座

邮编：201615

传真：021-64881400

邮箱：2885635536@qq.com

阿仪网商铺：http://www.app17.com/c76415/

产品分类/PRODUCT CLASS

技术文章

ELISA试剂盒实验操作程序总结

点击次数：823 发布时间：2016/8/22 9:48:00

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合elisa试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4.每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6.依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。
ELISA试剂盒的实验操作程序总结
1.准备试剂，样品和标准品
2.加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟
3.洗板5次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟
4.洗板5次，加入显色液A、B，37℃反应10分钟
5.加入终止液
6.15分钟之内度OD值
7.计算

上海劲马实验设备有限公司主营：elisa试剂盒销售、elisa实验外包、elisa技术指导、操作指导、elisa试剂盒代做实验、代做课题等技术服务。经过多年的磨练以及在实践中的认识，我们形成了独特的市场优势：产品齐全、价格合理、经营稳健、信息反馈及时、保证售前，售中，售后始终如一的提供*用心的服务，新老客户均可享受优惠折扣服务。

ELISA试剂盒http://www.shhdsj.com/shhdsw-ParentList-790912/

原创作者：上海elisa生物技术有限公司