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活细胞的标记步骤以及注意事项

点击次数：1349 发布时间：2016/8/1 9:58:17

活细胞的标记步骤以及注意事项是什么耐心看完下文你就会有了答案。
1.用蒸馏水配制贮存液，4摄氏度避光保存。标记时用蒸馏水稀释100倍。
2.吸去细胞培养基。
3.用PBS(+)冲洗细胞3次。
4.将细胞于Hoechst标记液中室温下孵育10一30分钟。
S.吸去标记液，并用PBS(+)冲洗3次，然后固定盖玻片:
注意事项
当Hoechst 33342结合至DNA后，其激发光波长约为343ml ,发射光波长约为483nm。对察时应使用紫外光滤光器。对共焦显微术而言，可用氢离子激光的紫外光作为激发光。
Hoechst 33343与DAPI相比，其优点是膜可透性的，因此可用于活细胞，而不需要对细胞固定及作透化处理。
Hoechst 33342结合富含AT区域的DNA小沟部分，结合后荧光大为增强。
Hoechst 33342亦可染固定的细胞，程序同DAPT

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