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为什么辣根过氧化酶(HRP)可以作为ELISA实验中常见的酶

点击次数:1519   发布时间:2015/7/16 9:40:16

   ELISA实验中的每一个试剂都是试剂盒的重要组成部分,特别是对酶的要求更高,ELISA中所用的酶要求纯度高、催化反应的转化率高、专一性强、性质稳定、来源丰富、价格不贵、制备成的酶标抗体或抗原性质稳定,继续保留着它的活性部分和催化能力。在受检标本中不存在与标记酶相同的酶。另外它的相应底物应易于制备和保存,价格低廉,有色产物易于测定,光吸收高。ELISA中*常用的酶为辣根过氧化酶(HRP)和从牛肠粘膜或大肠杆菌提取的碱性磷酸酶(AP)。HRP在蔬菜作物辣根中含量很高,纯化方法也不复杂。它是一种糖蛋白,含糖量约18%;分子量为44kD;是一种复合酶,由主酶(酶蛋白)和辅基(亚铁血红素)结合而成的一种卟啉蛋白质。主酶为无色糖蛋白,在275nm波长处有吸收峰;辅基是深棕色的含铁卟啉环,在403nm波长处有吸收峰,所以辣根过氧化酶(HRP)才能作为ELISA实验中常见的酶。
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