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点击次数：775 发布时间：2015/1/20 8:59:07
一、适应方法
1.直接适应细胞从血清的培养基为基。
2.连续的适应或脱机细胞从血清的培养基为SFM在几个步骤。
连续的适应往往是细胞比直接适应严酷少。
二、连续的适应
通道1，75%血清的培养基：25%基
通道2，50%血清的培养基：50%基
通道3，25%血清的培养基：75%基
从75%到100%的变化可能是太紧张的SFM细胞，可能需要把细胞2–3通道在10%血清的培养基：90% SFM混合物。大多数的细胞系可以被认为是完全适应后100% SFM 3通道。有时你可能会得到你过去的某一步甚至细胞之前100% SFM有麻烦。如果发生这种情况，回去和传代细胞2–3次血清前比补充媒体的无血清培养基。
三、对无血清培养的思考
总的来说，在无血清培养细胞的渗透压，pH，温度，机械力极端敏感，酶处理。
1.抗生素
不要在无血清培养基中使用抗生素。如果你这样做，我们建议您使用5到10倍不到你会在血清培养基中。这是因为血清蛋白会结合一定量的抗生素添加；没有这些血清蛋白抗生素的水平可能是某些细胞的毒性。
2.高密度
细胞必须与活力> 90%适应中的生长对数期。连续的适应可能是必要的。播种文化在一个更高的密度比正常在各通道在SFM适应可以帮助过程。因为有些部分的细胞不可能在新的文化环境中生存，有更多的细胞会增加活细胞数进一步通道。
3.丛生
细胞聚集往往发生在适应SFM。我们建议你轻轻地成团块打破他们当传代细胞。
4.形态
这是不寻常的在适应SFM后见细胞形态略有变化。只要倍增时间和细胞活性保持良好，在形态上的细微变化，不应该是一个值得关注的理由。
四、对培养的适应
为适应SFM的另一种方法涉及使用“条件培养基”。介质的细胞已生长在一个完整的通道，如果您选择这种方法，可以促进适应如下：
通道1，100%血清的培养基
通道2通道50%中从1:50左右SFM
通道3通道50%中从2:50左右SFM
原创作者：上海elisa生物技术有限公司