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点击次数:563 发布时间:2015/1/6 8:46:29
重点一:抗体的纯度
亲和层析纯化的抗体一般更受人们欢迎,因为这些产品的纯度,产生的非特异性背景*少。但是有些情况下也要考虑到纯化过程中损失的IgG部分,因为其中含有亲和力很高的抗体,尤其是当目的抗原存在的量很小的时候,高亲和性的IgG部分就显得尤为重要。
重点二:一抗的物种来源
一抗是在什么物种来源的,相应的二抗也要是抗该物种的抗体。例如,如果一抗是在小鼠体内制备的,那么你就应当选择抗小鼠的二抗,如果一抗是在兔体内制备的,那么二抗就应当是抗兔的抗体。至于二抗本身是在什么动物中制备的对二抗的质量并无明显的影响。
一抗是属于哪个类或亚类?二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。
重点三:常规抗体的应用
常规抗体优点包括Fc区域能够激活机体的免疫反应并结合到目标分子上使之被破坏。用完整抗体的缺点包括由于其分子太大不能被渗入到某些组织中。Fc区域通常能引起一些非特异性的结合,对抗体的检测的应用不利。
常规抗体在科研中用于通过蛋白质印迹、免疫组织化学以及酶联免疫吸附法等方法检测目的蛋白已经有十年了。完整大小的ELISA抗体还被应用于临床的检测,比如妊娠试验以及用ELISA检测血液中HIV病毒。
原创作者:上海elisa生物技术有限公司