在一些实验原理中,我们常常能够看到直接与间接这两个不同表达术语,今天上海劲马要与您探讨的科研血清学技术之凝集反应中,分有直接凝集反应与间接凝集反应两种。 首先我们来了解下凝集翻译是什么意思,将颗粒性抗原与相应的抗体结合,在一定的条件下,经过一定时间,出现肉眼可见的凝集小块,这一反应杯称为凝集反应。
● 直接凝集反应
1.玻片法这是一种定性试验方法。将含有已知抗体的诊断血清和待检菌液各一滴在玻片上混合。数分钟后,如出现肉眼可见的细菌凝集现象,即为反应阳性。
2.试管法这是一种定量试验。在一系列试管内,加入不同稀释度的等量待检血清(用生理盐水稀释)和等量的抗原,放入37摄氏度或56摄氏度水浴内,4h后观察结果,再放入冰箱放置一个晚上,然后再观察一次。血清的稀释度仍有明显可见的凝集现象,即为血清的凝集效价。效价越高,抗体含量越多。
此法可测定血清中抗体的相对含量,常用来测定患传染病的患者血清中抗体的效价,以协助临床诊断,如测定伤寒及副伤寒患者血清中抗体的肥达 氏反应。
● 间接凝集反应
将分子很小的胶体状态的不易发生凝集反应的抗原(或抗体),如病毒等,先吸附于一种与免疫无关的颗粒状物体(载体颗粒)的表面,然后与相应的抗体(或抗原)发生结合而出现凝集现象称间接凝集反应。由于这种凝集是借助于载体颗粒,使原来不发生凝集反应的抗原抗体发生结合,出现肉眼可见的凝集现象,故称为间接凝集反应。载体颗粒的作用是增大了抗原的反应面积,因而能使众多的复合物聚集成 团,被肉眼所见。 接凝集反应的灵敏度比直接凝集反应高10—400倍。
常用作载体颗粒的物质有红细胞、白陶土、聚苯乙烯乳胶颗粒和活性炭等。
用红细胞吸附抗原,再与相应抗体结合,出现凝集,称为正向间接血凝试验。吸附了抗原的红细胞,称为致敏红细胞。如果用红细胞先吸附抗体,再与相应抗原结合,出现凝集,称为反向间接血凝试验。如果先让抗原抗体结合,再加入致敏红细胞,不会发生凝集现象,称为间接血凝抑制试验。
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