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技术文章

上海劲马为elisa试剂盒的边缘效应问题解决与建议

点击次数:756   发布时间:2014/6/3 9:14:04

     天气越来越热,实验的保温可要注意了。虽然elisa试剂盒实验操作方便,实验可靠,但是操作过程要求有些繁琐。今天上海劲马来为您说说它的边缘效应问题解决与建议。

    在我们使用96孔板的实验测定时候,常发现有“边缘效应”,也就是外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应",并且可提高测定的重复性。 
       
上海劲马给您的实验建议:
    加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。太快的话无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。
         
    朋友们在需要使用elisa试剂盒时一定要根据自己的实验需要购买专用提取试剂盒,如果不是专用试剂盒,或许能提出RNA,但不能确保其质量以及完整性。

原创作者:上海elisa生物技术有限公司

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