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技术文章

您知道测量血红蛋白的方法吗

点击次数:1099   发布时间:2013/11/21 9:08:30

    您知道测量血红蛋白的方法吗?血红蛋白是高等生物体内负责运载氧的一种蛋白质,是使血液呈红色的蛋白。我们今天要说的就是关于血红蛋白,血红蛋白由四条链组成,两条α链和两条β链,每一条链有一个包含一个铁原子的环状血红素。那么下面重点先来看一看血红蛋白的测量方法。

    血红蛋白测量方法一般为比色法。比色法测量的原理是被测试溶液浓度的改变,改变了溶液颜色的深浅。溶液浓度越高,溶液的颜色就越深,反之如果溶液的浓度越低,颜色就越浅。颜色的深浅直接影响了溶液对光线的吸收程度。溶液颜色越深吸收的光线越多,透过的光线越少。反之,溶液颜色越浅吸收的光线越少,透过的光线越多。通过测量透过比色池光线的强弱,可以间接测量出溶液的浓度。它的测试依据应该遵循朗伯一比耳定律,这就是光电比色法测试的基本原理。

    而根据测试原理和血红蛋白测试机构的组成,影响血红蛋白测试的有一些主要因素,
1、测试机构的光路系统
    光路系统包括,光源灯供电电路,光源灯,透镜组,滤光片,比色池,光电转换器件(光电池,光电管)等。
    如果光源供电不稳,滤波不好,波纹过大,供电电压过低会影响光源灯的发光强度,和光源的稳定,影响测试的准确。此时按电路的维修程序,对电路进行调试修理,使之符合要求。光源灯暗、光源灯老化发光效率降低,影响测试值,会使测试值偏低。此时应该清洁灯泡,或更换新的光源灯。如果透镜组脏,影响透镜的透光程度,会影响测试值。此时要进行清洁透镜组。滤光片使用日久会受潮、老化、生霉或脏,而影响测试,此时应该认真清洗滤光片。如果滤光片老化变质,会影响滤光片的中心波长和滤光片的带宽。从而影响测试值,此时只能更换新的相同波长滤光片。
    比色池脏、漏气会影响测试值,因为脏不仅会影响透过比色池的光强度,如果比色池脏了并附着有气泡,会使通过比色池的光产生反射或散射,严重影响测试结果。这时要对比色池认真清洗必要时用蛋白溶剂浸泡、冲洗排除故障。
光电器件表面有灰尘或脏物会影响光的接收和光电信号的转换。此时要认真清洗,如果光电器件老化,只能进行更换。
2、液路系统
    液路系统包括进液管、输液管、泵管、电磁泵(或蠕动泵)及供电电路等部件。进液管脏、堵、裂隙会影响进液量,或吸入气泡,严重影响测量。这时要清洁冲洗,除去堵塞,有裂隙漏气要更换进液管。输液管、泵管,主要是脏和堵或老化。脏堵要认真冲洗。对泵管,因为挤压和摩擦容易发生粘连,或老化,严重的甚至磨破而漏气,所以对泵管要及时检查。损坏要及时更换。电磁泵(或蠕动泵)的故障主要是转动不灵活,卡死不转动,或供电电路故障。转动不灵活或者卡死不转动往往由于落入灰尘,与油形成油污所至。只要认真清洗可以排除故障。如供电电路问题按电路程序修理,泵本身损坏只能更换。综上述血红蛋白测量出现故障,往往出在光路和液路。因为现代电路比较成熟,使用的器件一般经过筛选故障率较低。所以血红蛋白测量系统出现故障,一般对光路和液路进行检查大多数故障可以排除。

血红蛋白的工作原理:
    血红蛋白与氧结合的过程是一个非常神奇的过程。首先一个氧分子与血红蛋白四个亚基中的一个结合,与氧结合之后的珠蛋白结构发生变化,造成整个血红蛋白结构的变化,这种变化使得第二个氧分子相比于个氧分子更容易寻找血红蛋白的另一个亚基结合,而它的结合会进一步促进第三个氧分子的结合,以此类推直到构成血红蛋白的四个亚基分别与四个氧分子结合。而在组织内释放氧的过程也是这样,一个氧分子的离去会刺激另一个的离去,直到完全释放所有的氧分子,这种有趣的现象称为协同效应。

血红蛋白的正常正常参值为:
成年男性:120~160g/L
成年女性:110~150g/L
新生儿:170~200g/L
儿童:110~160g/L

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原创作者:上海elisa生物技术有限公司

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