抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase , TRAP) 为近发现的骨吸收和破骨细胞活性的良好标志物, 测定血清中TRACP 尤其是TRACP-5b 的浓度, 有助于了解生理条件和各种病理条件下的骨代谢状况。
作用机制:
TRAP 缺乏和过度表达的大鼠模型分别表现为骨硬化和骨质疏松。骨吸收时, 破骨细胞附着在骨的表面, 分泌的酸和蛋白酶在骨基质与破骨细胞之间形成一个空隙, 磷酸酐酶和H+-ATP 酶质子泵在此空隙中形成一个酸性环境, 位于破骨细胞微粒体中的TRAP即通过破骨细胞波状缘分泌进入此空隙, 与其他酶一起参与骨基质中固体钙磷矿化物的降解。
骨细胞TRAP 具有细胞特异性,分泌呈激素应答模式并有复杂的调节机制。甲状旁腺激素能刺激破骨细胞分泌TRAP; 降钙素可有效抑制其分泌; 细胞外高浓度的钙离子可负反馈调节TRAP 的分泌; TRAP 的有效非竞争性抑制剂钼酸盐可使TRAP 导致的骨吸收面积减小。在破骨细胞内, 环磷酸腺苷(cAMP) 、细胞内钙和鸟苷酸结合蛋白(G蛋白) 也参与TRAP 的调节。
测定方法:
测定TRAP 采用静脉血清。测定TRAP 的方法有电泳法、比色法、ELISA 等方法。可以使用人骨纯化的破骨细胞TRAP - 5b 抗原制备的能识别人破骨细胞的单克隆抗体, 通过免疫分析的方法测定TRAP - 5b。此法特异性更强, 操作简便, 仅检测血清中有活性的TRAP - 5b 分子, 而不会受到无活性的TRAP - 5b 的干扰。
静脉血长时间暴露于空气中可以引起血pH 值升高, TRAP 活性发生不可逆性失活。保持TRAP 活性的方法是标本内加入醋酸盐缓冲液或抗坏血酸溶液, 一般在4 ℃可以稳定3 天。草酸盐、氟化物对TRACP 活性均有影响。
引用文献:
【文献标题】The participation of fibroblast growth factor 23 (FGF23)in the progression of osteoporosis via JAK/STAT pathway
【文献中引用产品】
大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)ELISA试剂盒
【关键词】Osteoporosis; FGF23; JAK/STAT pathway; bone metabolism; cartilage metabolism
【DOI】10.1002/jcb.26332
【出版期刊】《Journal of Cellular Biochemistry》
【产品原文引用】
Measurement of serum FGF23, osteocalcin, ALP, BALP, TRAP and CTX-I
Serum FGF23 levels were measured by an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) using an FGF23 kit (Kainos Laboratories, Tokyo, Japan). Serum osteocalcin content was determined by ELISA using an Osteocalcin EIA kit (Xinyubio-Technology, China). ALP activity was determined by ELISA using an ALP activity kit (Nanjing Jiancheng Biotech, China). BALP was measured by an electrochemilumi-nescence immunoassay (ECL) using the Access Ostase kit (Beckman Coulter Inc, USA). TRAP activity was determined by ELISA using the Acid-Phosphatase Kit (Shanghai Jinma Biological Technology, China). CTX-I was also measured by ECL using the Elecsys-CrossLaps/serum kit (Roche, USA).
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原创作者:上海elisa生物技术有限公司